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定量PCR技术简介
一、 定量PCR的基本原理: 在PCR实验条件下(Mg++、缓冲液、Taq酶、dNTP、引物、模板),经变性退火延伸的一个循环,引物在退火阶段与相应的模板结合,
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RT-PCR一些经验心得
一、RT-PCR原理 提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA 作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA 为模板
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临床PCR试剂盒的选用与质检
核酸提取 试剂核酸扩增或转录——核酸扩增 试剂产物检测试剂(有些使用全自动分析仪的PCR方法因其核酸扩增和检测同时完成,故无专门的产物检测试剂)寡核苷酸引物和探
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植物RAPD分析技术
RAPD(Randomly Amplified Polymorphic DNA),意为随机扩增多态性DNA,是利用PCR技术进行随机扩增,把扩增的DNA片段进行
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实时定量PCR技术综述
1.PCR反应动力学 右图为PCR反应曲线(横坐标为循环数,纵坐标表征产物量),不同的曲线代表初始模板量不同的 PCR反应。PCR反应的动力学公式为: C n
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单核苷酸多态性检测方法的研究进展
汪维鹏[1,2] 倪坤仪[2] 周国华[1,2] [1]华东医学生物技术研究所,南京210002 [2]中国药科大学分析化学教研室,南京210038 摘 要:
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多重PCR同时检测淋病奈瑟球菌及其青霉素、四环素耐药基因的研究
蒋 敏1 , 贾文祥3 , 陈 岚1 , 周 伟1 , 李文胜1 , (1. 四川大学华西第二医院, 四川成都610041 ; 2. 四川大学华西医院, 四川成
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分子标记的种类及其发展
黎裕 贾继增 王天宇(中国农科院作物品种资源研究所,北京100081)1 引言1.1 分子标记概念的界定广义的分子标记(molecular marker)是指可
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PCR-DGGE(Polymerase Chain Reaction-Denaturing Gradient Gel Electrophoresis)
1.了解PCR-DGGE技术的原理。 2.了解并熟悉PCR-DGGE技术的步骤。【实验原理】 变性梯度凝胶电泳(DGGE)是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分
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原位聚合酶链式反应与原位反转录聚合酶链式反应操作规程
(一)、 仪器 设备 英国Thermo Hybaid原位PCR仪。 (二)、操作流程 1、原位PCR步骤 1)预处理: (1)切片常规脱蜡; (2)0.2mol
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聚合酶链反应-单链构象多态性分析
PCR-SSCP分析的基本程序为:首先PCR扩增特定靶序列,然后将扩增产物变性为单链,进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。在不含变性剂的中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,D
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建立PCR实验室
为了对以个特定序列进行PCR做重复检测,需要三个不同的区域,每一个区域的具体技术操作和试剂在下面详细列出.1、样品准备区这个区域专门用作样品的准备,在制备和操作
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实时定量PCR(Real-time quantitative PCR)
mRNA表达的研究 微小残留病变的检测 肿瘤耐药基因表达的研究 病毒感染的定量监测Vs普通PCR,RT-PCR的优势 采用封闭的检测模式,因此扩增产物导致污染的
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查尔酮合成酶基因的克隆
一、实验目的与意义 学习PCR操作技术,利用基因全长引物,扩增出查尔酮合成酶基因的全长,使学生掌握PCR的基本原理和操作。 二、实验原理 聚合酶链反应(Poly
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PCR-SSP法在HLA-B27检测中的应用研究
摘要 应用序列特异引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术对181例临床标本进行HLA-B27检测,同时作血清学试验。结果:PCR方法和血清学方法分析结果基本相符