western-blot实验过程中常见问题及解答
常见问题解决对策 两块玻璃板之间灌胶，胶总是不平玻璃没有洗干净，应该洗得很干净过硫酸铵和TEMED加量相对较多加完试剂后应摇匀 总是漏胶避免
| 常见问题 | 解决对策 |
| 两块玻璃板之间灌胶，胶总是不平 | 玻璃没有洗干净，应该洗得很干净 |
| 过硫酸铵和TEMED加量相对较多 | |
| 加完试剂后应摇匀 | |
| 总是漏胶 | 避免玻璃边缘（与胶条接触处）破损 |
| 将两块玻璃板摆放对齐，底部处于同一平面 | |
| 膜上有明显气泡 | 操作时将气泡完全排除 |
| 靠膜一侧的滤纸应铺平 | |
| 特异性低 | 优化一抗 |
| 提高一抗和二抗的稀释度 | |
| 降低SDS-PAGE中蛋白的上样量 | |
| 背景高 | 优化封闭液 |
| 优化洗涤缓冲液，增加洗涤次数 | |
| 减少曝光时间 | |
| 信号低 | 优化一抗 |
| 浓缩样品 | |
| 选择更高灵敏度的发光液，如enlight等。 |
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