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免疫技术

分泌型IgA的分离与鉴定

2025-05-28 免疫技术 加入收藏
(一)材料与试剂 1.初乳 2.SephadexG200 3.0.10Mol/L pH6.8PB液 4.0.01Mol/L pH7.4PB液 5.DEAE52

(一)材料与试剂 1.初乳 2.SephadexG200 3.0.10Mol/L pH6.8PB液 4.0.01Mol/L pH7.4PB液 5.DEAE52 (二)操作方法 1.取初乳20ml,10 000rpm离心10min,弃去表面脂肪层及底部的沉淀物。 2.取乳清过SephadexG200柱(柱规格为2.50cm×90cm),以0.10Mol/L pH6.8PB液洗脱,第一峰为IgA(含IgG)。 3. 收集乳液,于0.01Mol/L pH7.4PB液中透析。 4. 将透析液浓缩至5mg/ml以上。 5. 过DE52 层析柱,用0.01Mol/L pH7.4PB液洗脱,洗下蛋白峰为IgG,弃去。 6. 换用0.10Mol/L pH6.8PB液或0.01Mol/L pH7.4PBS(0.10Mol/L NaCl)液洗脱, 收集洗脱液 ,即为较纯的IgA液。 7. 必要时,可再过一次SephadexG200柱。 8. 浓缩,鉴定

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