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免疫技术

Tris缓冲液(TBS和THB)的配制

2025-07-18 免疫技术 加入收藏
一、TBS的配制0.05 M TBS ( pH7.4 ) 的配制:Tris ( 三羟甲基胺基甲烷 ) 12.1gNaCl 17.5g加蒸馏水 1500ml磁性搅

一、TBS的配制

0.05 M TBS ( pH7.4 ) 的配制:

Tris ( 三羟甲基胺基甲烷 ) 12.1g

NaCl 17.5g

加蒸馏水 1500ml

磁性搅拌下滴加浓HCl至pH为7.4,再加蒸馏水至2000ml,即可。

如需含1% Triton X-100,则在滴加HCl前先加入20ml Triton X-100。

二、THB的配制

A液 ( 0.2 M Tris ):( MW 121.14 ) 称取2.428克 Tris,溶于100毫升蒸馏水中。

B液 ( 0.1 N HCl): 取37% HCl ( 比重1:19 ) 0.84毫升,加入蒸馏水中,使成100毫升。

不同pH ( 7.19 ~ 9.10 ) 的0.05 M THB配制:按下表,取A液25ml加B液Xml,补加蒸馏水至100ml。

B=XpHB=XpH
45.07.1925.08.14
42.57.3622.58.23
41.47.4020.08.32
40.07.5417.58.41
38.47.6015.08.51
37.57.6612.58.62
35.07.7710.08.74
32.57.877.58.92
30.07.965.09.10
27.58.05

免疫组织化学中,常用pH7.6的THB。


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