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微生物学

连续稀释分离法

2025-07-31 微生物学 加入收藏
①取1克土样,在火焰旁放入装有99毫克无菌水的锥形瓶内,充分摇匀,将菌分散。   ②用移液管吸取上述菌悬液1毫升,放入盛有9毫升无菌水的试管中,并进一步稀释成1

①取1克土样,在火焰旁放入装有99毫克无菌水的锥形瓶内,充分摇匀,将菌分散。

 

  ②用移液管吸取上述菌悬液1毫升,放入盛有9毫升无菌水的试管中,并进一步稀释成1000倍,即10 -3 的菌悬液。按10倍稀释法连续稀释到10 -8 (每1次稀释,都须更换移液管)。

 

  ③取3支1毫升移液管分别从10 -8 、10 -7 、10 -6 菌悬液中吸取1毫升菌悬液,分别注入编号10 -8 、10 -7 和10 -6 的培养皿内,同一稀释液重复做3个培养皿。

 

  ④将温度为45~50℃的营养琼脂培养基倒入上述各培养皿内,轻轻旋转使菌悬液充分混合均匀,凝固后,将培养皿倒扣放置在温暖处(28℃左右),每天观察培养基表面有无微生物菌落。

 

  ⑤经过一定时间培养后,培养基上长出菌落,根据菌落特征,初步判断属于何种类型的微生物,并在显微镜下检查,若菌体形态一致,则可认为是初步分离到纯菌种。

 

  ⑥将分离培养所得的纯菌种,从平板培养基转移到试管斜面培养基上培养。


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