各种组织特殊染色法—网状纤维染色

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网状纤维是一种纤细的纤维。它沿着网状细胞 和突起分支，并互相交织成网，因而被称为网状纤维，又因这种纤维对银的浸染着色特别显著。故又称为嗜银纤维。它主要由III型胶原蛋白构成，也具有642nm周期性横纹.它主要分布于骨髓、脾、淋巴结、肝和肺等脏器。癌组织中间未见有网状纤维，但在其边缘可见有大量的网状纤维，但在其边缘可见有大量的网状纤维围绕，俗称癌巢。 ⑴网状纤维的形成 它的形成主要是在纤维母细胞的粗面内浆网中，合成可溶性胶原。在醛糖、类脂的作用下，形成可溶性胶原，随后它被分泌到细胞外，在基质中（或在细胞的表面）通过原胶原蛋白 分子间的交联，聚合成为不溶性的胶原原纤维即网状纤维。 ⑵网状纤维在组织化学上的反应 网状纤维的主要成分是网硬蛋白，在组织化学上，网状纤维和胶原纤维是容易区别的。网状纤维是分支纤细的纤维。Van Gieson 氏染色 不显色或微红色。PAS反应呈现红紫色，银浸染为黑色。胶原纤维用Van Gieson氏染色为红色，PAS反应呈微粉红色。银浸染为黄色或棕黄色。 ⑶状纤维的显示 ①染色染料技术：从网状纤维的显示，区别和效果等方面，这种技术被认为是不可靠的，其原因是它只能跟胶原纤维区别开来。 ②金属浸染技术：这种技术对于显示网状纤维被认为是十分可靠和广泛使用的方法，它不但能够区别网状纤维和胶原纤维，而且可显示纤细的网状纤维。 嗜银反应（Argyrophil reaction）嗜银细胞与亲银细胞所不同的是需要一种附加的还原剂来还原，它们比亲银细胞数量多。必须注意：亲银反应中将找不到任何的嗜银细胞。 亲银反应（Argentaffin reation）亲银细胞有能力，直接地，不靠外加试剂，将银液中的银还原为一种不溶性的黑色金属银沉淀的细胞称为亲银细胞。（Cells that have the ability to directly reduce silver solution producing an insoluble black metallic silver precipitate are termed-angentaffin cells）。 ⑷网状纤维的显示方法 ①Gomori’s法 ②Godon and sweet’s法 ③Wilder’s法 ④Foot’s法 1、Gomori’s法 ⑴试剂的配制。取10%硝酸银3份，加入10%的氢氧化钾1份，混合后产生大量的黑色沉淀物，倒去表面的液体，保留下沉淀物，加入10-20倍或更多的蒸馏水进行冲洗，连续冲洗3次。待沉淀物清晰则可。用浓氨水逐滴加到溶液中。使沉淀物逐步溶解。待见沉淀物剩少数几颗时，再取10%的硝酸银液加入数滴，至溶液再现浑浊为止。再用氨水将其溶解，然后稀释10-15倍。即可使用。平时保存于4℃冰箱中。 ⑵操作步骤： ①切片脱蜡至水，蒸馏水洗， ②用0.5%高锰酸钾氧化5min， ③自来水洗，继用蒸馏水洗， ④用2%草酸漂白切片2min， ⑤自来水洗，蒸馏水洗， ⑥2%硫酸铁铵媒染5min， ⑦水洗，蒸馏水洗， ⑧滴入氨性银溶液浸染3-5min， ⑨蒸馏水洗数次， ⑩10%甲醛液还原5-10min， ⑾水洗2min， ⑿用核固红染色10-15min， ⒀水洗10min，各级酒精脱水， ⒁常规透明，中性树胶封固。 结果：网状纤维黑色，核红色，胶原纤维黄棕色。