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成功转染siRNA的主要关键点有什么?
1.设计合成有效的siRNARNAi的核心需要siRNA对相应mRNA进行有效的结合和作用。siRNA的设计合成首先很重要,最优的设计可以用最小的工作浓度取得满
2025-01-11 17 -
病毒包装过程中,细胞大量死亡,还有必要收集病毒吗
在病毒包装过程中,如果观察到细胞大量死亡,是否还要收集病毒需要根据具体情况判断。以下是一些可能的考虑因素:病毒滴度:尽管细胞大量死亡,仍然有可能产生高滴度的病毒
2025-01-11 24 -
细胞转染效率低的原因及解决方案
细胞转染是细胞生物学和分子生物学的一种常用的技术手段。而转染效率低下却是实验人员经常遇到的问题,尤其是原代细胞转染,转染难度更大。现分享几个细胞转染实验常见的几
2025-01-11 17 -
siRNA细胞转染应注意的事项
为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点:1.纯化siRNAsiRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结
2025-01-11 19 -
如何优化RNA转染条件?
可从以下几方面进行优化:1.纯化RNA在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余
2025-01-11 15 -
细胞的聚集体培养
聚集体培养(aggregate culture) 是指先将肿瘤细胞在旋转摇动培养仪上培养,使肿瘤细胞形成规则的细胞球体结构,然后再将球体进行静止培养,肿瘤细胞可
2025-01-11 21 -
单层细胞如何用胰蛋白酶处理?
下述方案描述的是采用胰蛋白酶处理细胞,进行细胞的传代或收集。维持细胞系的方法通常为每周传代一次,在传代的前一天换培养液;但是某些细胞系需要更频繁的传代。每种细胞
2025-01-11 15 -
都说RNAi很容易降解,转染效率很低,是真的吗?
RNAi就是利用降解双链RNA的酶系统,人工引入一段和目标RNA互补的序列,这样,在细胞内形成双链RNA,诱发降解机制,使目标RNA降解,无法被进一步翻译。在转
2025-01-11 14 -
做好RNA转染的几点建议
1.纯化RNA在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,
2025-01-11 14 -
shRNA转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例,说一下shRNA转染步骤(24孔板)1.提前1天细胞种植贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇
2025-01-11 16 -
如何解决病毒感染细胞效率低的难题?
病毒感染细胞本来效率就较低,一定要注意以下几点:1.感染时的培养基尽量少些;2. 使用病毒感染增强剂Envirus-LV来提高感染效率。 病毒感染
2025-01-11 19 -
细胞培养该不该加抗生素?
细胞有没有正常生长,或细胞是否污染,是细胞培养的关键。虽然,顺利的时候,细胞培养起来很简单,可不顺的时候就会出现各种问题——-细胞污染啦、细胞生长缓慢啦、细胞形
2025-01-11 17 -
siRNA转染常见问题及解决方案
1. RNA与转染试剂比例不佳由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化
2025-01-11 16 -
细胞生长速度非常快,现在在密度20-30%时就开始转染,但是到了60小时后细胞密度已经非常高,几乎没有空隙。如果继续等待,是否会导致细胞状态不佳,从而影响到实验中蛋白的表达效果。
细胞密度确实会影响转染效率和蛋白表达。如果细胞密度过高,可能会导致以下问题:营养和废物积累:高密度会导致培养基中的营养迅速消耗,废物积累增加,这会影响细胞的健康
2025-01-11 17 -
质粒DNA转染实验效率影响因素
1,质粒的构建:启动子的选择启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响,但是对转染结果却有着微妙的影响。2, 质粒的大小和质量
2025-01-11 19