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体外培养细胞的一般性质(一)
细胞的存活及生长具有贴壁依赖性绝大多数实体组织来源的细胞,在离开机体、于体外生存生长时,都具有贴壁依赖性,即以单层形式附着在培养瓶或培养皿表面的方式生长。如果无
2025-01-09 18 -
电转染实验时,DNA有什么要求?
使用Entranster-E电转染试剂进行电转染实验时,应使用高纯度、无菌和无污染的DNA进行电穿孔实验。质粒DNA要求无内毒素,OD值为1.8-2.0。
2025-01-09 14 -
siRNA转染效率不理想的原因
siRNA转染效率不理想,常见的原因有:1. RNA与转染试剂比例不佳由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下
2025-01-09 13 -
细胞电转后,72小时铺板加药筛选是否可行
一般情况下,在细胞电转后进行72小时的培养再加药筛选是可以的。具体取决于你的实验设计和细胞类型。以下几点你可以考虑:细胞恢复时间:不同的细胞系在电转后需要不同的
2025-01-09 13 -
病毒感染细胞效率低怎么办?
病毒感染细胞本来效率就较低,一定要注意以下几点:1.感染时的培养基尽量少些;2. 使用Envirus-LV,可以提高感染效率20-50倍。病毒感染细胞本来效率就
2025-01-09 15 -
细胞冻存的7个注意事项
方法:冻存液最好现配:按1:3:6(或1:2:7) 配冻存液1份DMSO3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基)。取生长状态量好的细胞进
2025-01-09 16 -
怎样做好细胞电转染实验?
要想做好细胞的电转染实验,应注意以下几点:1. 选择合适的电场强度合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低
2025-01-09 11 -
电转染实验中易出现的问题
1. 不合适的电场强度合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形
2025-01-09 13 -
siRNA细胞转染过程中常见问题及解答
问:siRNA导入细胞有哪些方法,哪种最好?答:siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依
2025-01-09 16 -
双质粒共转染哺乳动物细胞
可能的原因:质粒竞争效应:在共转染过程中,两个质粒可能在转染效率、复制能力或表达资源(如转录因子和核糖体)上竞争。一个质粒可能因此受到抑制,导致其表达量下降。解
2025-01-09 18 -
如何做好DNA转染实验?
我认为,要想做好质粒DNA细胞转染实验,应注意以下几点:1, 质粒的大小和质量线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时
2025-01-09 18 -
为什么我的细胞转染效率低?
1)优化条件:质粒不同,所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外,可选
2025-01-09 12 -
怎样提高悬浮细胞的siRNA转染效率?
悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
2025-01-09 19 -
如何选择慢病毒和腺病毒系统?
慢病毒载体系统和腺病毒载体系统比较病毒表达系统慢病毒表达系统(Lentivirus)腺病毒表达系统(Adenovirus)病毒基因组RNA病毒双链DNA病毒复制
2025-01-09 17 -
关于细胞培养基你需要知道的那些事
大多数实验室购买的培养基是预先处理好的瓶装液体培养基,或者是干粉状的需要水化和过滤除菌的培养基,后者比较便宜,用量大时更有价值。由于培养基中都有酚红或其他染料p
2025-01-09 10