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实时荧光定量PCR为什么倍受青睐?
一、 实时荧光定量PCR技术是一种新型的科学定量方法,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行
2025-01-08 35 -
转子的类型及用途
转子主要有4 种类型:角式、外摆式、连续流式以及区带式。只有角式与外摆式转子是标准的实验室仪器,另外两种只用作专门用途。角式转子用途:样品浓缩。实验室中的“苦力
2025-01-08 18 -
慢病毒感染后,未能实现相关敲降的原因是什么?
慢病毒感染后未能实现敲降的原因可能有多种。以下是一些可能的原因及其解释:慢病毒包装质量问题:病毒滴度较低,导致感染效率不高,可能无法有效转导目标细胞。病毒颗粒中
2025-01-08 21 -
降落PCR实验原理及步骤
降落PCR(touchdown PCR),一种PCR技术,主要用于PCR的条件的优化。在许多情况下引物的设计使得PCR难以进行,例如特异性不够易错配等。退火温度
2025-01-08 19 -
测定蛋白质浓度前需要知道什么?
因为蛋白质是细胞结构与功能的主要分了成分,因此常常需要测定样品中蛋白质的含量,鉴定混合物中的特殊蛋白质,以及分析蛋白质的组成和序列。此外,蛋白质分析对合成用于诱
2025-01-08 22 -
Northern Blot原理及所需仪器、试剂
一、原理:在变性条件下将待检的RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳,继而将在凝胶中的位置转移到硝酸纤维素薄膜或尼龙膜上,固定后再与同位素或其它标记物标记的RNA探针进行
2025-01-08 12 -
RNA的提取方法及原理
RNA提取原理RNA提取时,加氯仿后分三层:水相(含rna,可能还有少量DNA),中间白色薄层(应该是蛋白和DNA),下层有机相(氯仿和蛋白等)氯仿是分子量比较
2025-01-08 15 -
PCR实验步骤及常见问题汇总
聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复
2025-01-08 13 -
western-blot化学发光(ECL)的特异性差怎么办
特异性差,出现杂带或非特异条带的原因可能有以下几个方面:1. 蛋白上样量过大。可降低蛋白上样量。2. 一抗是多克隆抗体,或一抗、二抗浓度太高。可更换成单克隆抗体
2025-01-08 17 -
昼夜节律转录因子BMAL1在生殖内分泌学和生育中的关键作用
脑和肌肉芳烃受体核转位蛋白1(BMAL1)是昼夜节律振荡的核心成分,参与了许多生理活动。越来越多的证据表明BMAL1在生殖生理学中发挥着重要作用。2022年3月
2025-01-08 12 -
western-blot化学发光(ECL)时,胶片上条带很浓怎么办?
可通过以下几个方面进行改进:1. 可减少蛋白上样量;2. 降低一抗二抗稀释度,减少抗体孵育时间;3. 如果背景深的话,则要把发光液沥干些再压片;如果背景不深则需
2025-01-08 9 -
动物基因组DNA的提取
实验原理 在EDTA和SDS等去污剂存在下,用蛋白酶K消化细胞,随后用酚抽提,可以得到哺乳动构基因组DNA,用此方法得到的DNA长度为100-150 kb,适用
2025-01-08 8 -
如何提高PCR反应的特异性?
1、巣式pcr(Nest-PCR)可增加稀有靶序列的灵敏度;降低了扩增多个靶位点的可能性;提高PCR特异性2、递减PCR(Touch Down PCR):前几个
2025-01-08 11 -
什么是反向PCR?
1、原理反向PCR(reverse PCR)是用反向的互补引物来扩增两引物以外的未知序列的片段,而常规PCR扩增的是已知序列的两引物之间DNA片段.实验时选择已
2025-01-08 10 -
AFLP原理和操作步骤
AFLP是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。本AFLP 技术主要特点 :分析所需 DNA 量少,仅需 0.5g;可重复性好
2025-01-08 9