实验方法

western-blot实验步骤

Western，也称Western blot、Western blotting、Western印迹，是用抗体检测蛋白的重要方法之一。可按照以下步骤操作。1.收集

染色质免疫共沉淀（ChIP）实验原理

染色质免疫共沉淀可以：（1）组蛋白修饰酶的抗体作为“生物标记”；（2）转录调控分析；（3）药物开发研究；（4）DNA损失与凋亡分析。实验方法原理：在保持组蛋白和

蛋白质分离实验——细胞裂解方法

当分离蛋白质时，包含有蛋白质的细胞和细菌须先被裂解。物理法裂解。利用各种机器来完成，例如：1. 氮气气穴弹。氮气解压是裂解真核细胞的一种温和方法，存在于一定压力

western-blot化学发光（ECL）出现高背景是什么原因？

做Western Blot发光实验经常有“背景太高”问题的出现，要弄清楚“背景太高”的原因，先要知道“背景”是什么，“背景”也是发光，影响发光的因素就会影响背景

实时荧光定量PCR技术简介

实时荧光定量 PCR（Quantitative Real-time PCR）是一项以 PCR 反应为基础的 DNA 定量技术，通过对目标基因在扩增过程中产生的拷

常用抗生素溶液有哪些？

贮存液a工作浓度抗生素浓度保存条件严紧型质粒松弛型质粒氨苄青霉素50mg/ml(溶于水)-20℃20μg/ml60μg/ml羧苄青霉素50mg/ml(溶于水)-

western-blot实验常见问题及解决方案（enlight）

导致western Blot发光（ECL）“背景高”的原因有哪些？

Western Blot发光经常有“背景太高”问题，导致“背景高”的原因有很多，主要有以下几个方面：1. 抗体浓度过高，洗涤不充分，可以造成抗体在膜上的非特异结

蛋白质的长期保存——以冻干固体的形式保存

一种按适当配方制造的冻干蛋白质制剂能够在几年内保持稳定，即使是在室温(Carpenter and Chang 1996) ；然而，冻干配方的最佳溶液组成和工艺条

离心的种类和原理

离心方法主要有两种：制备型（用来分离某些颗粒）和分析型（用来了解分离颗粒的物理性质）。分子或细胞生物学实验室中所作的决大多数离心机属于制备型离心机，而多数常规制

如何提高qPCR反应的灵敏度与特异性？

1. 首先确定模板RNA完整性好，无DNA污染。2. RNA模板中不应含有扩增反应抑制剂。3. 为了防止模板降解，在反应体系中加入RNase抑制剂RNasin。

磷酸钙转染法实验原理及步骤

【实 验 原 理】磷酸钙沉淀法是基于磷酸钙-DNA复合物的一种将DNA导入真核细胞的转染方法。磷酸钙有利于促进外源DNA与靶细胞表面的结合。磷酸钙-DNA复合物

琼脂糖凝胶电泳拖尾了怎么办？

跑过琼脂糖凝胶电泳的小伙伴，是不是经常遇到过电泳拖尾的现象啊？相信不少人点头如捣蒜了。提个质粒拖尾，提个DNA拖尾，连PCR也拖尾，拖尾什么的最常见了。验证也就

寡聚（dT）-纤维素柱层析法分离纯化mRNA

【试剂与器材】（一）试剂1． 0.1mol/L NaOH ，每组200mL2． 寡聚Oligo（dT）-纤维素3． 加样/洗涤缓冲液1：0.5 mol/L Na

SDS 碱裂解法制备质粒DNA: 少量制备

该实验方案是从少量( l ~ 2mL ) 细菌培养物中分离质粒DNA 。DNA 产量为l00ng~ 5μg ， 这取决于质粒的拷贝数。少量的DNA 作为体外酶促