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体外诊断试剂-超级ELISA优化方案
3 竞争抑制ELISA方法的建立 3.1 抗体的酶标记及质量鉴定 本试验采用改良过碘酸钠法将辣根过氧化物酶标记在抗体上[1],标记完后取上清用Sephedex
2025-05-29 4 -
3H-TdR掺入法检测IL-2的生物活性
3 H-TdR 掺入法检测IL-2的生物活性 【材料和试剂】 (1) 反应细胞:CTLL-2,存活率应>95%。 (2) I
2025-05-29 5 -
ELISA中的试剂-酶的底物
3.3 酶的底物 3.3.1 HRP的底物 HRP催化过氧化物的氧化反应,最具代表性的过氧化物为H2O2,其反应式如下: DH2+ H2O2 D+ H2O
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ELISA中的试剂-结合物
3.2 结合物 结合物即酶标记的抗体(或抗原),是ELISA中最关键的试剂。良好的结合物应该是既保有酶的催化活性,也保持了抗体(或抗原)的免疫活性。结合物中酶
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多克隆抗体的制备方法
2. 抗原与填料的连接 这一步是整个纯化过程中最关键的一步,如果在这一步上有什么失误,建议你从step one重新开始吧。 首先要注意一点:常见的连接方法都基
2025-05-29 4 -
中性粒细胞碱性磷酸酶活性定量测定法
1 原理 中性粒细胞中的碱性磷酸酶(简称碱酶)在一定条件下能使β-甘油磷酸钠水解释出无机磷, 后者与钼酸试剂结合成磷钼酸复合物, 再以氨基萘酚磺酸还原为钼蓝
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血小板计数法(直接试管法)
1 原理 用一种能破坏血液中的红细胞,但能保护血小板形态完整的稀释液稀释血液,滴入血细胞计数池,在高倍镜下直接计数血小板数。2 器材和试剂 器材同白细胞
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中性粒细胞中毒性颗粒检查法
1 试剂 a.固定液:甲醇。 b.磷酸盐缓冲液:1%磷酸二氢钾30ml,1%无水磷酸氢二钠20ml,用蒸馏水加至100m1。 c.姬姆萨染色液: 由
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中性粒细胞碱性磷酸酶活性组织化学检查法
1 试剂 a.固定液:加甲醛10ml于无水甲醇90ml中。 b.缓冲底质液(须临用时配制):由10%巴比妥钠30ml、3.2%β-甘油磷酸钠30ml、M
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阴性结果常见原因
① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。 ② 确认所有的试剂是否按正确的顺序滴加,是否孵育了足够的时间。 ③ 对照抗体的标签确认是否使
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酶联免疫吸附测定(ELISA)操作要点
1 标本的采取和保存可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本
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淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术
1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗
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淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体制备方法
1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗
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检测抗DNA(ssDNA和dsDNA)抗体知识问答
1957年Ceppelini等首次报道了系统性红斑狼疮(SLE)患者的血清成分可与DNA发生反应,随后建立了几种定性和定量检测抗DNA抗体的方法。随着研究的不断
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14―3―3σ
14 ― 3 ― 3 σ 14―3―3σ定位于lp35。14―3―3σ基因的功能主要是使DNA损伤后细胞周期停止于G2期。正常情况下,DNA损伤诱导
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