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SDS-PAGE检测蛋白表实验操作步骤
一、材料与仪器30%丙烯酰胺溶液;1.5mol/L Tris-HCl分离胶缓冲液,pH8.8;1.0mol/L Tris-HCl浓缩胶缓冲液,pH6.8;电泳缓
2024-12-03 32 -
双缩脲试剂测定蛋白质含量
蛋白质鉴定一、原理:蛋白质含有两个以上的肽键,因此有双缩脲反应。双缩脲反应是指蛋白质在碱性溶液中与二价铜离子结合,生成紫红色络合物的反应。其颜色的深浅与蛋白质的
2024-12-03 28 -
免疫组化实验过程中的要点和技巧
1.固定: 最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片,甲醛固定有时比冰冻丙酮好;但对于不同的组织和抗原 ,可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而
2024-12-03 26 -
Western Blot免疫印迹实验操作方法
Western免疫印迹(western blot )是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物
2024-12-03 37 -
高通量多肽阵列技术的应用与主要特点
多肽阵列技术是研究蛋白质相互作用的方法之一,是也近年来发展起来的高通量 实验技术,这种新型生物芯片可以直接揭示蛋白质间的相互作用。后基因组 时代,科学家们已将研
2024-12-03 25 -
各种各样的蛋白标签 从容应对蛋白实验
我们知道,不少蛋白实验都离不开抗体。但是,即使抗体公司时不时推出新产品,许多蛋白还是没有相应的抗体,很多情况下我们只能望产品叹气的份了。而且,我们还要面对很多抗
2024-12-03 21 -
斐林试剂测定还原糖
一、原理:还原糖可以将斐林试剂中德二价铜离子还原为一价铜。反应终点可由次甲基蓝指示,根据一定量德斐林试剂完全还原所需的还原糖量,可计算所加入样品中还原糖的含量。
2024-12-03 37 -
原核表达操作步骤及注意事项
将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。这种方法在蛋白纯化 、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有
2024-12-03 26 -
甘氨酸的作用
甘氨酸(Glycine)又名氨基乙酸,为非人体必需氨基酸。 名称缩写:Gly 甘氨酸是氨基酸系列中结构最为简单,人体非必需的一种氨基酸,在分子 中同时具有酸性和
2024-12-03 23 -
酪氨酸的作用
酪氨酸是一种含有酚羟基的芳香族极性α氨基酸。L-酪氨酸是组成蛋白质的20种氨基酸中的一种,是哺乳动物 的必需氨基酸,又是生酮和生糖氨基酸。酪氨酸的作
2024-12-03 28 -
脯氨酸的作用
脯氨酸proline是一种环状的亚氨基酸,在组成蛋白质的常见20种氨基酸中唯一的亚氨基酸。脯氨酸(Pro)是植物 蛋白质的组分之一,并可以游离状态广泛存在于植物
2024-12-03 30 -
通用电气Biacore——蛋白质相互作用研究好帮手
关于检测蛋白质相互作用的仪器,GE Healthcare 推出的Biacore值得了解。在过去N年的时间里,Biacore系统是广大科研工作者的好帮手,使用其发
2024-12-03 27 -
美发明新型固体NMR法检测蛋白结构
近日,美国俄亥俄州立大学、国立卫生研究所 (NIH)信息技术中心的研究人员在《Nature chemistry》杂志上发表最新研究成果“Protein fold
2024-12-03 25 -
影响外源基因在巴氏毕赤酵母中表达的因素
(李欣 郭树华 军事医学科学院放射医学研究所 北京 100850) 摘要 要在一种宿主表达系统中成功表达外源蛋白并获得较高产量,必须要较为全面地了解影响其表达的
2024-12-03 24 -
酵母表达外源蛋白
1、 菌株用GS115表达不出蛋白,换KM71H后,大部分克隆 能表达。2、温度: 在28度和室温下诱导表达,表达水平可能都不低。3、pH手册上用6.0,pH
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