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细胞色素b5的测定
细胞色素b5存于高等动物内质网膜的一种细胞色素。可从兔肝微粒体中提纯。因为与膜结合,用蛋白酶或表面活性剂处理可以使其溶解。还原型和氧化型的最大吸收光谱分别为55
2024-12-03 29 -
细胞色素P-450的光谱测定
细胞色素P450(cytochromeP450或CYP450,简称CYP450)为一类亚铁血红素—硫醇盐蛋白的超家族,它参与内源性物质和包括药物、环境化合物在内
2024-12-03 38 -
NI-NTA蛋白提纯的原理、步骤与常遇问题分析
Ni柱中的氯化镍或者硫酸镍可以与有HIs(组蛋白)标签的碱性蛋白蛋白结合,组蛋白标签一般是6个组氨酸(碱性氨基酸)。在蛋白上样后,带有组氨酸标签的蛋白特异性结合
2024-12-03 81 -
影响蛋白超滤的因素以及使用超滤膜的注意事项
超滤主要采用多孔材料,在压力驱动下将物质进行膜分离的过程,这种多孔材料成为超滤膜,那么影响蛋白超滤实验的主要因素有哪些呢?使用超滤膜处理蛋白有哪些注意事项呢?蛋
2024-12-03 40 -
蛋白测序的原理、步骤、以及N端测序服务的注意事项
蛋白测序的主要策略是采用化学或者酶消化方法将多肽链拆分,然后测定氨基酸残基含量和组成。本文详述了蛋白质测序的概念,蛋白测序的步骤以及蛋白N-端测序服务等。一、概
2024-12-03 32 -
货比三家,教你选对SDS-PAGE预制胶设备
现在,SDS PAGE已成为蛋白实验不得不会的,不过,人家可不是随随便便就让你做出漂亮的结果哦,有时花几天,可能都得不到一张满意的图片,这是,小编建议你要试试预
2024-12-03 52 -
凯氏定氮法测定蛋白质的含量
一、原理有机含氮化合物与浓硫酸共热消化,氮转化为氨,再与硫酸结合成硫酸铵。硫酸铵与强碱反应,放出氨。将氨蒸馏到过量的标准无机溶液中,再用标准碱溶液进行滴定。根据
2024-12-03 27 -
SDS-PAGE检测蛋白表实验操作步骤
一、材料与仪器30%丙烯酰胺溶液;1.5mol/L Tris-HCl分离胶缓冲液,pH8.8;1.0mol/L Tris-HCl浓缩胶缓冲液,pH6.8;电泳缓
2024-12-03 41 -
双缩脲试剂测定蛋白质含量
蛋白质鉴定一、原理:蛋白质含有两个以上的肽键,因此有双缩脲反应。双缩脲反应是指蛋白质在碱性溶液中与二价铜离子结合,生成紫红色络合物的反应。其颜色的深浅与蛋白质的
2024-12-03 34 -
免疫组化实验过程中的要点和技巧
1.固定: 最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片,甲醛固定有时比冰冻丙酮好;但对于不同的组织和抗原 ,可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而
2024-12-03 35 -
Western Blot免疫印迹实验操作方法
Western免疫印迹(western blot )是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物
2024-12-03 44 -
高通量多肽阵列技术的应用与主要特点
多肽阵列技术是研究蛋白质相互作用的方法之一,是也近年来发展起来的高通量 实验技术,这种新型生物芯片可以直接揭示蛋白质间的相互作用。后基因组 时代,科学家们已将研
2024-12-03 32 -
各种各样的蛋白标签 从容应对蛋白实验
我们知道,不少蛋白实验都离不开抗体。但是,即使抗体公司时不时推出新产品,许多蛋白还是没有相应的抗体,很多情况下我们只能望产品叹气的份了。而且,我们还要面对很多抗
2024-12-03 27 -
斐林试剂测定还原糖
一、原理:还原糖可以将斐林试剂中德二价铜离子还原为一价铜。反应终点可由次甲基蓝指示,根据一定量德斐林试剂完全还原所需的还原糖量,可计算所加入样品中还原糖的含量。
2024-12-03 45 -
原核表达操作步骤及注意事项
将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。这种方法在蛋白纯化 、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有
2024-12-03 30