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植物叶蛋白的提取
一、实验目的 熟悉植物 叶蛋白的几种提取原理和方法,了解其意义及其应用价值。 二、实验原理 植物叶蛋白或称绿色蛋白浓缩物(leaf protein concen
2024-12-02 35 -
原核表达(原理、材料与实验方案)
一、原理 1、 E . coli 表达系统 E . coli 是重要的原核表达体系。在重组基因转化入E . coli 菌株以后,通过温度的控制,诱导其在宿主菌内
2024-12-02 28 -
葡聚糖凝胶柱层析纯化PPO粗酶液
一、原理1.葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析 利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,凝胶
2024-12-02 34 -
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳试剂准备与操作步骤
一、原理细菌体中含有大量蛋白质,具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用,通过加热使蛋白质解离,大量的SDS结合蛋白质,使其带相同密度的负电
2024-12-02 27 -
福林酚试剂法测定蛋白质含量
一、原理:蛋白质与福林酚试剂反应,生成深蓝色复合物。蓝色的深浅与蛋白质含量成正比。可用分光光度计 于500nm波长下进行测定。与标准曲线对照,而确定蛋白质含量。
2024-12-02 28 -
PPO活性测定的原理方法与结果分析
一、原理与方法PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO催化邻苯二酚形
2024-12-02 25 -
植物蛋白质提取方法大全
一、植物 组织蛋白质提取方法1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。2、把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后
2024-12-02 33 -
植物组织蛋白质提取操作方法大全
一、植物 组织蛋白质提取方法1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。2、把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后
2024-12-02 28 -
Western blot 实验步骤及其注意事项
一.实验步骤 1. 组织块称重 2. 利用液氮、研钵粉碎组织块 3. 加入RIPA缓冲液(每克组织3 ml RIPA),PMSF(每克组织30μl,10 mg/
2024-12-02 32 -
Science:首次利用新技术在天然条件下成功获得G蛋白偶联受体3D结构
一个由德国、瑞典和美国组成的国际研究组首次在室温条件下,利用LCLSX射线激光器,成功解码一种重要G蛋白偶联受体(GPCR)的3D结构。同时验证了LCLSX射线
2024-12-02 23 -
蛋白质电泳-在蛋白质组学中的应用
原 理 蛋白质分子 在溶液中由于其末端氨基、末端羧基及侧链的游离基团而成为带电颗粒,并可在电场内移动,其移动方向取决于蛋白质分子所带静电荷。不同蛋白质分子根据其
2024-12-02 28 -
专家点评:如何预防双向凝胶电泳中的水平条纹
在此我们着重讨论了水平条纹的原因和预防。在对任何双向条纹问题进行问题排查时,必须记住两件事:1)水平条纹是由第一向(等电聚焦或IEF)中的不完全聚焦引起的,而2
2024-12-02 31 -
大肠杆菌作为生物反应器获得特异蛋白需注意“N端法则”
在大肠杆菌 中表达的蛋白质,首先由methionyl aminopeptidase酶在其N端切掉甲硫氨酸(Met),当+2位置的氨基酸具有较大的侧链基团时,会影
2024-12-02 28 -
常用试剂盒:BCA Protein Assay Kit
在蛋白质定量试验中,最常用的方法是BCA法蛋白定量 。那么为什么我们要选择用BCA法?而且常常使用到BCA蛋白定量试剂盒(BCA Protein Assay K
2024-12-02 36 -
蛋白抽提指南(TRIZOL)
在用酒精沉淀出DNA(DNA抽提 中的步骤一)后剩余的苯酚—乙醇上清中可以抽提出蛋白。沉淀的蛋白可通过蛋白
2024-12-02 27