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氨基酸的离子交换柱色谱分离
【原 理】 本实验采用磺酸型阳子交换树脂(732型)分离酸性氨基酸(天冬氨酸Asp pI=2.97)和硷性氨基酸(赖氨酸Lys pI=9.74)的混合液。在pH
2024-11-29 20 -
常用的标记免疫酶及其底物
1.标记酶的选择条件⑴ 活性高,分解底物的能力强。⑵ 特异性强,即作用于底物的专一性强。⑶ 与抗原抗体结合后仍保持酶的活性。⑷ 与底物作用可以显色。⑸ 纯度高、
2024-11-29 23 -
一些提高蛋白质的稳定性的方法
1.葡萄糖异构酶(GI)在工业上应用广泛,为提高其热稳定性,朱国萍等人在确定第138位甘氨酸(Gly138)为目标氨基酸后,用双引物法对GI基因进行体外定点诱变
2024-11-29 26 -
NusA技术:显著增强各种“难溶蛋白”可溶性
NusA融合蛋白表达系统于9年前(1999年)由Davis发明,并在2000年由Novagen首先进行商业化设计和开发,特别推荐用于以NusA作为N端标签时
2024-11-29 24 -
蛋白浓缩基本方法
蛋白浓缩方法基本有: 丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸铵沉淀法;(低温)有机溶剂沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超滤法;透析法;离子交换层析 和冷冻干燥
2024-11-29 23 -
蛋白质的定量测定实验
蛋白质的定量分析是生物化学和其它生命学科最常涉及的分析内容,是临床上诊断疾病及检查康复情况的重要指标,也是许多生物制品,药物、食品质量检测的重要指标。在生化实验
2024-11-29 28 -
蛋白质的浓缩技术
蛋白质浓缩技术是免疫学 中常用的手段,现介绍几种常用的浓缩技术。 (一)透析袋浓缩法 利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无
2024-11-29 22 -
蛋白的生物活性测定方法
结晶紫法活性测定 1、取对数生长期的人胰腺癌SW1990细胞,用0.25%胰酶(以无钙镁离子PBS溶液配制,pH7.4)消化后,加入RPMI-1640培养基
2024-11-29 22 -
如何做原核表达
人们合成与生物相关的物质是从尿素开始的,1828年,德国化学家维勒人工合成了存在于生物体的这种有机物。在1960年我国科学家采用化学方法首次成功地合成了具有生物
2024-11-29 20 -
非常全面的各个蛋白数据库链接
随着生物信息学、蛋白组学的发展,研究蛋白结构域,蛋白序列等研究越来越成为必备技能,因此,蛋白数据库的了解和使用越来越显得重要。对此,北京大学 医学部就列出了
2024-11-29 21 -
Folin
一、 目的 掌握Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法,熟悉分光光度计 的操作。 二、原理 Folin-酚试剂法包括两步反应:第一步是在碱性条件下,蛋白质
2024-11-29 30 -
酚试剂(Lowry)法测血清蛋白质含量
一、 相关理论 1、 血清(浆)蛋白质是血清(浆)固体成分中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化和物。 2、 血清(浆)蛋白质的分类: 目前已研究的有300 余
2024-11-29 20 -
蛋白质的性质(一)蛋白质及氨基酸的呈色反应
一、目的: 1、了解构成蛋白质的基本结构单位及主要连接方式 2、了解蛋白质和某些氨基酸的呈色反应原理 3、学习几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法 二、呈色反
2024-11-29 24 -
Western Blot Protocol实验步骤
一、提取抗原 蛋白 将提取RNA途中留存的样品,加入150μl100%酒精充分混匀,静置5min(RT),2000g,4℃离心5min,吸取上清至新管中,加入7
2024-11-29 18 -
凝胶层析法蛋白质脱盐
一、原理:含盐蛋白质溶液流经凝胶层析柱 时,低相对分子 量的盐分子 因浸入凝胶颗粒的微孔中,所以向下移动的速度较慢;而大分子的蛋白质不能进入凝胶颗粒的微孔,
2024-11-29 21