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蛋白质的表达、分离和纯化
目的要求(1)了解克隆基因表达的方法和意义。(2)了解重组蛋白亲和层析分离纯化的方法。实验原理克隆基因在细胞中表达对理论研究和实验应用都具有重要的意义。通过表达
2024-12-04 58 -
植物基因在大肠杆菌中的原核表达
通过大肠杆菌表达目的基因大量获得重组蛋白是一个方便快捷的方法。植物中克隆的目的基因被克隆到特异设计的质粒载体上,受噬菌体T7强启动子控制;表达由宿主细胞提供的T
2024-12-04 64 -
原核表达:遇到瓶颈怎么办
我想表达遇到的第一个瓶颈估计就是为什么我的外源片段插到载体里面,PCR鉴定没问题,双酶切也OK,可是就是不见表达。一般我们是如何判断没有表达呢?大多都是首先进行
2024-12-04 61 -
人类蛋白质组表达谱蛋白质鉴定的分步搜索策略
吴松锋,朱云平,贺福初 军事医学科学院放射医学研究所,北京 100850 Key Words: 蛋白质组;蛋白质鉴定;蛋白质数据库;质谱 Abstract 大规
2024-12-04 41 -
His Tag的功与过
先介绍一下His Tag,为5-15 His 串在一起的小肽, 在表达纯化中用的较为普遍的一种Tag, 从本质上说它是一种亲和性Tag,但也个案证明其也能做一些
2024-12-04 45 -
His-Tag原核表达――Qiagen
分子诊断近年来Qiagen公司无论在分子诊断方面,还是核酸、蛋白纯化方面都有出色的表现。在分子诊断这一块,根据Kalorama Information网站自20
2024-12-04 57 -
原核表达条件优化
影响E.coli 中蛋白表达量的因素影响E.coli 中蛋白表达量的因素除载体启动子结构以外,还有质粒拷贝数、质粒稳定性、mRNA结构、密码子的偏爱性和宿主菌的
2024-12-04 64 -
原核表达--宿主菌株选择指南
原核蛋白表达在原核蛋白表达过程中,选择构建一个合适原核表达体系需要综合考虑3大因素:表达载体、宿主菌株、表达诱导条件,以获得最满意的表达效果。事实上,在平时的实
2024-12-04 67 -
表达蛋白的生物学活性的检测
一、MTT比色法检测细胞活性(一)原理活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷,其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达
2024-12-04 66 -
种子蛋白质系统分析:种子蛋白质组分分析
一、目的 种子蛋白质由10%-15%的原生质蛋白质(复合蛋白质)和85%-90%的贮藏蛋白质(简单蛋白质)组成。Osbome 在种子中发现与分离出来清蛋白、球蛋
2024-12-04 42 -
Cas9 蛋白过表达慢病毒包装
一、试剂准备1、Cas9 过表达慢病毒载体选择。货号名称CR2001pLV-Cas9-PuroCR2002pLV-Cas9-NeoCR2003pLV-Cas9N
2024-12-04 77 -
在大肠杆菌(E.Coli)表达蛋白产物
一、原理 1、 E . coli 表达系统 E . coli 是重要的原核表达体系。在重组基因转化入E . coli 菌株以后,通过温度的控制,诱导其在宿主菌内
2024-12-04 62 -
原核表达实验方法
一、原理1、E .coli 表达系统E .coli 是重要的原核表达体系。在重组基因转化入E .coli 菌株以后,通过温度的控制,诱导其在宿主菌内表达目的蛋白
2024-12-04 62 -
最新融合表达的亲和纯化小标签StrepTaq
在重组蛋白纯化的过程中,研究者常常利用融合表达的各种亲和标签,通过一步法亲和纯化的方法获得自己的目的蛋白。其中,6His•Tag标签因其氨基酸个数少、对蛋白活性
2024-12-04 71 -
毕赤酵母表达系统在外源基因表达中的研究进展及应用
张伍魁*范清林宋礼华 (安徽医科大学基础医学院合肥230032) 摘要巴斯得毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统作为一个日臻完善的外源蛋白真核表达
2024-12-04 74