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DNA胶回收实验技术总结
胶回收一. 提高胶回收量的办法:1) 增加电泳时的上样量。2) 电泳缓冲液用新鲜配制的。3) 切胶时尽量只切有条带的胶,减小切胶体积:含目的片断很少的胶就不要要
2024-11-20 39 -
EMSA(PROMEGA)
凝胶迁移实验 以下问题是以Promega公司试剂盒为例。 [InstallDir_ChannelDir]mob/72360.shtml 1)什么是凝胶迁移或电泳
2024-11-20 22 -
其他电泳技术
⒈IEF/SDS-PAGE双向电泳法 1975年O′Farrall等人根据不同组份之间的等电点差异和分子量差异建立了IEF/SD S-PAGE双向电泳。其中I
2024-11-20 21 -
DNA的琼脂糖凝胶电泳简介
琼脂糖凝胶电泳对核酸的分离作用主要是依据它们的相对分子量质量及分子构型,同时与凝胶的浓度也有密切关系。 1 、核酸分子大小与琼脂糖浓度的关系 (1 )DNA 分
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核酸电泳实验
琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的标准方法。该技术操作简便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度离心法)所无法分离的DNA片段。当用低浓度的荧光嵌入染料溴
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如何防止聚丙烯酰胺垂直电泳漏胶现象已成为实验室研究人员比较头疼的问题!
如何防止聚丙烯酰胺垂直电泳漏胶现象已成为实验室研究人员比较头疼的问题!1. 固定玻璃板时,先将厚薄玻璃板在桌面对齐后在垂直面上稍微向厚板倾斜 20
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DNA限制性酶切及凝胶电泳,实验原理及方法
实验原理一. DNA的限制性内切酶酶切分析限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三
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双向电泳常见问题
1. 重泡胀后的胶可以不用转移到另一个电泳槽 ,直接跑 2D 的一向吗? 一般情况下是可以的。但当上样量特别大时,可能会有一部分蛋白质没有被胶条吸收,这样跑完
2024-11-20 24 -
蛋白质组学入门--双向电泳篇
1. 重泡胀后的胶可以不用转移到另一个电泳槽 ,直接跑 2D 的一向吗? 一般情况下是可以的。但当上样量特别大时,可能会有一部分蛋白质没有被胶条吸收,这样跑完
2024-11-20 19 -
电泳切胶的小技巧
&NBS p;电泳切胶注意事项:1、电泳的buffer和gel都是新制的,切胶的台子清理干净,刀片最好洗净灭菌,总之一句话就是保证切下的带没有外源DNA污染。2
2024-11-20 27 -
SDS-PAGE检测外源蛋白的表达实验操作步骤
[实验原理]SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS—PAGE)是蛋白分析中最经常使用的一种方法。它是将蛋白样品同离子型去垢剂十二烷基硫酸钠(SDS)以及巯基乙醇一
2024-11-20 22 -
蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作方法
【材料与试剂】(1)2SDS凝胶加样缓冲液(2)聚丙烯酰胺凝胶电泳槽和电泳仪(3)加样器和吸头等(4)水浴锅【操作方法】(1) 把上述处理的样品按1:1(V/V
2024-11-20 24 -
Native-PAGE常见问题及其解析锦集
1. 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 时预电泳是怎么回事的?预电泳时要加6DNA上样缓冲液吗?电泳1-2小时再加结合反应产物吗?预电泳是除去凝胶中没有聚合的单体和双体
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双向电泳蛋白点的切取和保存及其注意事项
1. 用 PDQuest软件 或肉眼比对,找出感兴趣的蛋白点,并做好标记和记录。2. 用 MilliQ水冲洗胶 2 次。3. 用色谱纯甲醇和 MilliQ水冲洗
2024-11-20 27 -
双向电泳各部分操作大全
1. 总的策略① 化学试剂纯度要高,至少是分析级,目前国产试剂达不到纯度要求 ② 使用去离子水(电导<2uS) ③ 尿素和丙烯酰胺/甲叉丙烯酰胺需新鲜配制
2024-11-20 22