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Northern杂交实验指导之三:DNA片断亚克隆
Northern Blotting技术专题A. 载体选择为了获得能够在体外转录 RNA探针的DNA模板,其克隆载体必须带有可供选择的特异转录启动子,同时,为了获
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Northern杂交实验指导之四:模板DNA制备
Northern Blotting技术专题A.质粒 DNA的小量提取试剂及其配制含AP的LB液体培养基TE缓冲液:10mmol/L Tris-HCl (pH 8
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Northern杂交实验指导之一:RNA提取
Northern Blotting技术专题方法一、改良异硫氰酸胍提取法试剂及其配制异硫氰酸胍变性液:贮存液-在含484ml 水(经DEPC处理), 17.6ml
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Northern杂交实验指导之六:印迹杂交
Northern Blotting技术专题探针 准备DIG标记的RNA探针与DNA探针相比,显示较强的杂交信号和较地的非特异性背景,因此,只要可能选用RNA探针
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Northern杂交实验指导之五:RNA探针制备
Northern Blotting技术专题五、RNA探针 制备(根据the DIG system user's guide)A. 地高辛标记的体外转录试
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蛋白质的定量法与标准曲线的制备
Western Blot技术专题 LOWRY法蛋白定量专题A. Folin-phenol(lowry method)定量法此法以Biuret方法反应为基础发展而
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Western Blot内参抗体选择原则
Western Blot技术专题 Western Blot内参抗体产品选择专题内参抗体 种类很多,比如β-actin、β-tubunlin、GAPDH、Lami
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关于脱脂奶粉和BSA作为封闭剂的一些问题
生物实验中的封闭剂Q:western blot 中脱脂奶粉封闭的是哪些蛋白?原理是什么?A:脱脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原 的蛋白去封闭膜,
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选择封闭剂的几点技巧
生物实验中的封闭剂杂交膜上有很多非特异性的蛋白质结合位点,为防止这些位点与抗体结合引起非特异的染色和背景,一般用惰性蛋白质或非离子去污剂封闭膜上的未结合位点来降
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Northern-Blotting杂交技术的实验原理与实验方法
探针的原理及其应用 Northern Blotting技术专题Northern 杂交是RNA定量测定的一种检测方法,主要利用碱基配对原则,利用特性的DNA探针
2024-11-22 32 -
Western blot中NC膜和PVDF膜的选择及其特点
western blot 中膜的选择是实验成功的关键点,Western blot实验中一般可以选择硝酸纤维素膜(NC) 和PVDF膜,那NC膜和PVDF膜有什么
2024-11-22 32 -
Western Blot原理、试剂配制、操作步骤
Western免疫印迹(western blot )是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物
2024-11-22 22 -
Western Blotting实验为什么必须要用内参?
要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot。因为Western Blot操作相对简单方便,既可以定性分析
2024-11-22 33 -
Southern blot实验方法与步骤详解
用于检测重组DNA,也可分析DNA样品中是否有与探针序列同源的DNA片段。用于基因诊断,也可验证检测片段的分子量大小。将基因组DNA经限制性内切酶酶切,进行琼脂
2024-11-22 24 -
Western Blot试剂的准备配方大全
1. 30%储备胶溶液: 丙烯酰胺(Acr) 29.0g 亚甲双丙烯酰胺(Bis) 1.0g 混匀后ddH2O,37℃溶解,定容至100m
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