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外源DNA片段和线状质粒载体的连接
外源DNA片段和线状质粒载体的连接,也就是在双链DNA5'磷酸和相邻的3'羟基之间 形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸,可
2024-10-24 27 -
如何确定RNA质量的经验谈
1)检测RNA 溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景(溶液浑浊度)、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般的,我们只看OD260
2024-10-24 22 -
Fractionation of Nuclear and Cytoplasmic RNA by Trizol--分别提取细胞核和细胞质RNA
T℃OS-M6 cells grow in 6-well plates, 2ml media totalT℃V1PD cells grow in 100mm p
2024-10-24 21 -
提取植物组织RNA的要点
从植物组织中提取RNA是进行植物分子生物学方面研究的必要前提。要进行Northern杂交分析,纯化mRNA以用于体外翻译或建立cDNA文库,RT-PCR及差示分
2024-10-24 26 -
肝脏细胞RNA的提取
一.原理RNA提取技术不仅是分子生物学技术的重要组成部分,也是功能基因组 学科研技术的重要基础。从RNA水平研究生物体内基因的调控机制,已成为分子生物学研究的一
2024-10-24 20 -
细胞总RNA的提取
1. 六孔板每孔细胞中加入1ml Trizol,冰上放置5min,枪头吹打。2. 将各孔裂解液吸到1.5 ml EP管中,加入氯仿0.2ml/管,用力振摇15s
2024-10-24 22 -
蓝白斑筛选假阴性
质粒除有抗性基因外,往往还带有其他明显的筛选标记,最常用的是蓝白斑筛选( -半乳糖苷酶系统)。此类载体携带lacZ’基因,它编码β-半乳糖苷酶的N-末端(α-肽
2024-10-23 15 -
苯酚法提取酵母RNA
(一)原理细胞内大部分RNA 均与蛋白质结合在一起,以核蛋白的形式存在。因此,提取RNA时要把RNA与蛋白质分离并除去。将细胞置于含有十二烷基磺酸钠(Sodiu
2024-10-23 27 -
RNA提取心得
一、组织RNA提取1. 最好新鲜组织,这样RNA提取的效果比较好,这是肯定的。2. 如果不是新鲜的(最好在半年之内,-80或者液氮中冻存的)组织,注意不要反复冻
2024-10-23 22 -
大肠杆菌抽取RNA
之前已分别构筑出GUS 基因的表现质体pQG11,若要令启动子T5promotor 的启动受到更好的调控,应进一步将pQG11 转形至大肠杆菌M15[pREP4
2024-10-23 20 -
RNA 的提取
RNA 提取物的完整性是进行电泳的主要目的之一。在有EB 存在时,完整未降解的RNA制品电泳图谱应可清晰看到18S rRNA、28S rRNA 两条带,也应当能
2024-10-23 23 -
真核细胞总RNA的提取与鉴定
【原理】RNA的制备与分析对于了解基因表达在转录水平上的调节是必不可少的,也是最常使用的通过cDNA途径分析细胞基因表达的前提。通常一个典型的哺乳动物细胞约含1
2024-10-23 37 -
RNA 的制备与分析
RNA:主要由四种核糖核苷酸组成,即腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胞嘧啶(C)、尿嘧啶(U)。天然的RNA并不象DNA那样呈双螺旋结构,而是单链线形分子。只有局部
2024-10-23 22 -
TaKaRa RNAiso Reagent
本制品是一种快速方便的总RNA提取试剂,可以从动物组织、植物材料、各种微生物、培养细胞等中提取总RNA。样品在RNAiso Reagent中能够充分被裂解,在加
2024-10-23 25 -
酵母RNA的提取
一、目的:学习稀碱法提RNA的原理与技术。二、原理:由于RNA的来源和种类很多,因而提取制备方法也各异,一般有苯酚法、去污剂法和盐酸胍法。其中苯酚法又是实验室最
2024-10-23 53