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初学者的Southern杂交与化学发光检测
本期主题为“水稻基因组 DNA的 Southern杂交与非放射性ECL直接核酸标记及检测”,主要是满足初学者对Southern杂交的了解。 Southern杂交
2024-11-22 71 -
印迹(blotting)
印迹(blotting)是生物学实验中常用的检测和分析方法。印迹(blotting)实验的过程可以简单描述为将待检测的生物大分子 经电泳等方法分离后转移并固定在
2024-11-22 52 -
Western Blot免疫印迹实验原理/试剂准备等操作规程
Western免疫印迹(western blot )是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物
2024-11-22 55 -
几种核酸杂交技术的比较 点杂交实验原理、步骤
本文主要简单阐述了Southern杂交、Northern杂交、原位杂交 、点杂交这几种核酸杂交方法的异同点。并介绍了点杂交的基本概念及实验原理、方法。(1)几种
2024-11-22 71 -
Northern杂交实验指导之七:结果检测
Northern Blotting技术专题&NBS p;方法一、化学发光检测试剂及其配制:洗膜缓冲液:100mmol Maleic acid150mmol Na
2024-11-22 56 -
Northern blotting步骤
Northern Blotting技术专题1. 取RNA2. 将电泳槽 和板,梳齿浸泡在3%H2O2中20-30分钟,并吹干3. 跑1%琼脂 糖凝胶,检测样本R
2024-11-22 58 -
Northern杂交实验指导之三:DNA片断亚克隆
Northern Blotting技术专题A. 载体选择为了获得能够在体外转录 RNA探针的DNA模板,其克隆载体必须带有可供选择的特异转录启动子,同时,为了获
2024-11-22 59 -
Northern杂交实验指导之四:模板DNA制备
Northern Blotting技术专题A.质粒 DNA的小量提取试剂及其配制含AP的LB液体培养基TE缓冲液:10mmol/L Tris-HCl (pH 8
2024-11-22 44 -
Northern杂交实验指导之一:RNA提取
Northern Blotting技术专题方法一、改良异硫氰酸胍提取法试剂及其配制异硫氰酸胍变性液:贮存液-在含484ml 水(经DEPC处理), 17.6ml
2024-11-22 68 -
Northern杂交实验指导之六:印迹杂交
Northern Blotting技术专题探针 准备DIG标记的RNA探针与DNA探针相比,显示较强的杂交信号和较地的非特异性背景,因此,只要可能选用RNA探针
2024-11-22 57 -
Northern杂交实验指导之五:RNA探针制备
Northern Blotting技术专题五、RNA探针 制备(根据the DIG system user's guide)A. 地高辛标记的体外转录试
2024-11-22 61 -
蛋白质的定量法与标准曲线的制备
Western Blot技术专题 LOWRY法蛋白定量专题A. Folin-phenol(lowry method)定量法此法以Biuret方法反应为基础发展而
2024-11-22 65 -
Western Blot内参抗体选择原则
Western Blot技术专题 Western Blot内参抗体产品选择专题内参抗体 种类很多,比如β-actin、β-tubunlin、GAPDH、Lami
2024-11-22 213 -
关于脱脂奶粉和BSA作为封闭剂的一些问题
生物实验中的封闭剂Q:western blot 中脱脂奶粉封闭的是哪些蛋白?原理是什么?A:脱脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原 的蛋白去封闭膜,
2024-11-22 64 -
选择封闭剂的几点技巧
生物实验中的封闭剂杂交膜上有很多非特异性的蛋白质结合位点,为防止这些位点与抗体结合引起非特异的染色和背景,一般用惰性蛋白质或非离子去污剂封闭膜上的未结合位点来降
2024-11-22 65