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经典双向电泳操作步骤指导大全
水化上样( 被动上样)1. 从冰箱中取出 IPG 胶条,室温放置 10min。2. 沿水化盘槽的边缘从左向右线性加入样品,槽两端各 1cm 左右不加样,中间的样
2024-11-20 58 -
预制胶——轻松应对蛋白电泳
现在,聚丙烯酰胺 凝胶电泳 (PAGE)已经成为实验室的最常规实验了。不过可别小看了这个实验,它比核酸电泳可复杂多了,需要准备的试剂多,耗时也长,而且每一次跑出
2024-11-20 47 -
琼脂糖(Agarose)的特性知多少
学生物的人对琼脂 、琼脂糖这两个词一定都不会陌生。不过它们是同一样东西抑或有所差别呢?我想不少人都会犯迷糊了。没关系,且听我细细讲来。首先,琼脂 和琼脂糖不光中
2024-11-20 57 -
双向电泳的样品的制备原则、步骤及注意事项
样品制备原则样品制备是双向电泳中最关键的一步,将直接影响 2-DE 结果好坏。目前并 没有一个通用的样品制备方法,尽管处理方法多种多样,但都遵循几个基本的原则:
2024-11-20 56 -
定量蛋白质组学荧光差异凝胶电泳技术
要开展蛋白质组 学研究,双向电泳是你必须了解掌握的最基础的蛋白质分离技术,正如普通凝胶电泳 对于核酸纯化。可是一提起双向电泳,多数人还是会直皱眉头----别摇头
2024-11-20 57 -
完整的双向电泳操作流程
一、第一向等电聚焦1. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液(I)(不含DTT,不含Bio-Lyte)一小管(1ml/管),置室温溶解。2. 在小管中加入
2024-11-20 76 -
双向电泳细胞样品与组织样品处理方法
一、培养细胞(culture Cell )样品处理方法:培养动物组织细胞由于没有细胞壁,因此可以将细胞收集下来,直接加入裂解缓冲液(Lysis buffer)抽
2024-11-20 59 -
SDS-PAGE测定蛋白质分子量及多酚氧化酶的纯度鉴定
一、实验目的与原理蛋白质在聚丙烯酰胺 凝胶中电泳时,它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现,如果在聚丙烯酰胺系统中加
2024-11-20 69 -
蛋白质醋酸纤维薄膜电泳
一、原理:蛋白质分子 在一定的PH条件下,由于基团解离而带有一定的电荷,在含有缓冲液的醋酸纤维薄膜上,受电场作用而以一定的速度向一定的方向移动。不同的蛋白质分子
2024-11-20 62 -
转移电泳实验技术操作方法
原理:转移电泳是将经聚丙烯酰胺凝胶电泳 分离出的蛋白质谱直接转移到硝酸纤维膜上,而形成固定相,并同时排除各种干扰物质,保持其天然构象和生物学活性,完成在凝胶中难
2024-11-20 60 -
聚丙烯酰胺凝胶(PAGE胶电泳)电泳的方法与银染方法
PAGE胶电泳(聚丙烯酰胺凝胶电泳 )主要是以PAGE为介质,根据DNA分子大小和电荷分离DNA分子。PAGE胶电泳采用银染法进行显色。银染的原理:一、银离子(
2024-11-20 252 -
琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验的内容
本文介绍了琼脂糖凝胶电泳检测DNA的设备、材料以及详细的实验步骤,也讲述了琼脂凝胶的特性供广大读者参考。[实验原理]琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常
2024-11-20 64 -
广州赛诚生物EMSA核心实验技术:实验原理
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA 结合 蛋白 和其相关的DNA结合
2024-11-20 70 -
总RNA的变性琼脂糖凝胶检测
RNA提取【实验目的】掌握总RNA变性胶电泳的原理和方法。【实验原理】RNA电泳可以在变性及非变性两种条件下进行。非变性电泳使用1.0-1.4%的凝胶,不同的R
2024-11-20 121 -
Western Blot的心得体会
Western Blot技术专题做了五个月的western blot ,有一点点小心得,给新手点经验.蛋白提取:1. 总蛋白提取(胞膜,胞浆,胞核):组织匀浆后
2024-11-20 77