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反转录 RT-PCR 实验流程
原理一、总 RNA 的提取见总 RNA 的提取相关内容。二、cDNA 第一链的合成目前试剂公司有多种 cDNA 第一链试剂盒出售,其原理基本相同,但操作步骤不一
2024-05-17 54 -
RT-PCR技术
原理提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA,再以cDNA为模板进行PCR扩增,从而获
2024-05-17 23 -
PCR-SSCP 技术实验
原理PCR-SSCP技术的基本原理是PCR扩增后的DNA片段经变性成单链DNA,单链DNA在中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳时形成不同的立体构象,其构象直接影响泳动速率
2024-05-17 30 -
限制性片段长度多态性(RFLP)分析
原理1. DNA 限制性内切酶具有识别特定的DNA 序列并在特定的部位切断DNA 双链的活性功能,DNA 分子由于突变(核苷酸的置换、插入或缺失)改变(或形成)
2024-05-17 28 -
引物延伸实验
材料与仪器RNAT4多核苷酸激酶 dATP 醋酸钠 乙醇 EDTA RNaseA 苯酚 氯仿恒温培养箱 NAP-5柱 -70C冰箱 低温离心机步骤1. 依次加
2024-05-17 33 -
用 dUTP 净化 PCR 产物的实验
材料与仪器dNTP 溶液 MgCl2 溶液 PCR 缓冲液 引物 尿嘧啶-DNA-糖基酶 Taq DNA 聚合酶PCR 仪 离心管步骤一、材料1. 试剂(1)d
2024-05-17 24 -
高 GC 含量片段的 PCR 扩增实验
材料与仪器甜菜碱 dNTP 溶液 二甲基亚砜 四甲基砜 Taq 酶和酶缓冲引物PCR 仪步骤一、材料1. 试剂甜菜碱(Sigma 公司)dNTP 溶液(含四种
2024-05-17 32 -
大片段的精确扩增实验
材料与仪器甜菜碱 PCR 反应缓冲液 TEN+BSA 酶和酶缓冲液 核酸及引物PCR 仪步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂灭菌水配制的下列试剂,储存在指定的温
2024-05-17 24 -
PCR 产物纯化实验
材料与仪器TE 或去离子水 PCR 产物离心机和转子 PCR 滤 件 微量离心管步骤一、材料1. 缓冲液和溶液TE(lOmmol/L Tris-HCl,lmmo
2024-05-17 27 -
PCR 产物定量实验
材料与仪器DNA 标准 TE PCR 产物荧光计 金属箔纸 微量离心管步骤方法 A: 荧光测定法荧光测定法可以在纳克级范围精确定量。荧光计和 DNA 定量试剂盒
2024-05-17 21 -
测序反应实验
材料与仪器循环测序试剂盒 引物和模板薄壁 PCR 管 热循环仪 GeneAmpPCRSystem9700 仪步骤一、材料1. 缓冲液和溶液ABI PRISM B
2024-05-17 33 -
纯化测序反应产物实验
材料与仪器甲酰胺 核酸 寡核苷酸ABI PRISM 3100Genetic Analyzer 微量离心管 DTR Gel Filtration Cartridg
2024-05-17 22 -
从全血中纯化基因组 DNA 实验方法
材料与仪器乙醇 异丙醇 RNA 酶 A 全血琼脂糖凝胶电泳 离心管 Wizard 基因组 DNA 纯化试剂盒步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂乙醇,70%,室
2024-05-17 27 -
以硅膜为基础分离基因组 DNA 实验
材料与仪器PBS Na2 HP04 KH2PO4 NaCl KC1 消化液 MasterMix 蛋白酶 K自动定位器 P250 盒装吸头 平板密封条 Vac-M
2024-05-17 16 -
以磁珠为基础分离基因组 DNA 的实验方法
材料与仪器全血 口腔涂片或样品污染物 二硫苏糖酵 乙醇 异丙醇 裂解缓冲液自动定位器 P250 盒装吸头 血液基因组高产量系 96 孔收集板 BiomekFX
2024-05-17 18