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粘性末端克隆
原理限制性内切酶能够识别并酶切双链 DNA 分子中的特定核苷酸序列，使目的 DNA 片段和载体产生不平齐的粘性末端，然后在 DNA 连接酶的作用下，将酶切后的目
2024-05-17 24 -
Topo 克隆
简介是一种基于转座子元件的 DNA 插入方法，适用于插入小片段的 DNA 序列（约为 4~5 kb）。原理TOPO 克隆技术是基于一个特殊的转座子序列—— pU
2024-05-17 30 -
SLIC 克隆
简介SLIC 克隆是一种基于 DNA 重组技术的克隆方法，通过利用外源 DNA 和目的 DNA 的线性化切片段相互衔接，使用序列无关的连接酶将它们连接起来，从而
2024-05-17 23 -
快速点突变分子克隆
简介利用一次 PCR 方法进行定点突变分子克隆，较盒式突变及其它传统方法更快速简便。原理PCR 原理: 在 DNA 聚合酶催化下，以母链 DNA 为模板，以特定
2024-05-17 20 -
酵母基因组 DNA 提取
简介首先利用含有离液盐的溶液裂解酵母，以确保大分子彻底变性。之后加入乙醇，裂解物离心通过微量离心管时，DNA 会结合到离心柱硅胶模上。在洗涤去除污染物后，将 D
2024-05-17 28 -
溴化乙锭法（DNA 浓度和纯度的测定）
原理溴化乙锭（EB）是一种嵌入型染料，其上的一个菲啶环可插入到 DNA 或 RNA 链的堆积碱基之间。溴化乙锭的嵌入基团与碱基的接近使二者紧密结合。DNA 吸收
2024-05-17 24 -
PCR 反应体系与反应条件、Taq 酶的选择、循环参数的设定
原理聚合酶链反应（Polymerase chain reaction, PCR）是一种在体外快速扩增特定基因或 DNA 序列的方法。双链 DNA 分子在临近沸点
2024-05-17 23 -
试剂分装流程
试剂分装的一般流程：1. 准备工作：清洁环境：在无菌条件下操作，提前对分装区域进行清洁和消毒，确保无尘、无菌、无污染。个人防护：佩戴实验服、手套、口罩、护目镜等
2024-05-17 868 -
反转录 RT-PCR 实验流程
原理一、总 RNA 的提取见总 RNA 的提取相关内容。二、cDNA 第一链的合成目前试剂公司有多种 cDNA 第一链试剂盒出售，其原理基本相同，但操作步骤不一
2024-05-17 54 -
RT-PCR技术
原理提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA，再以cDNA为模板进行PCR扩增，从而获
2024-05-17 23 -
PCR-SSCP 技术实验
原理PCR-SSCP技术的基本原理是PCR扩增后的DNA片段经变性成单链DNA，单链DNA在中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳时形成不同的立体构象，其构象直接影响泳动速率
2024-05-17 30 -
限制性片段长度多态性（RFLP）分析
原理1. DNA 限制性内切酶具有识别特定的DNA 序列并在特定的部位切断DNA 双链的活性功能，DNA 分子由于突变（核苷酸的置换、插入或缺失）改变（或形成）
2024-05-17 28 -
引物延伸实验
材料与仪器RNAT4多核苷酸激酶 dATP 醋酸钠 乙醇 EDTA RNaseA 苯酚 氯仿恒温培养箱 NAP-5柱 -70C冰箱 低温离心机步骤1. 依次加
2024-05-17 33 -
用 dUTP 净化 PCR 产物的实验
材料与仪器dNTP 溶液 MgCl2 溶液 PCR 缓冲液 引物 尿嘧啶-DNA-糖基酶 Taq DNA 聚合酶PCR 仪 离心管步骤一、材料1. 试剂（1）d
2024-05-17 24 -
高 GC 含量片段的 PCR 扩增实验
材料与仪器甜菜碱 dNTP 溶液 二甲基亚砜 四甲基砜 Taq 酶和酶缓冲引物PCR 仪步骤一、材料1. 试剂甜菜碱（Sigma 公司）dNTP 溶液（含四种
2024-05-17 32
