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详细介绍引物设计原则
引物设计原则一：1. 引物的长度一般为15-30 bp，常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于Taq DNA聚合酶
2024-11-09 29 -
PCR之引物详解
1. 引物是如何合成的？ 目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。 DNA 合成仪有很多种 , 主要都是由 ABI/PE 公司生产，无论采用什么机器合成，合成
2024-11-09 28 -
多年PCR经验总结
一、增加PCR的特异性1. primers design这是最重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的 一些条件（1）足
2024-11-09 27 -
PCR引物合成技巧
引物合成介绍1.引物是如何合成的？目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种, 主要都是由ABI/PE 公司生产，无论采用什么机器合成，合成的
2024-11-09 25 -
PCR引物设计之个人心得篇
记得当初写本科论文，感到不知道讨论什么问题好。愣是写了一大段的PCR条件摸索的讨论。后来PCR成为实验最基本的一步了，但是发现在PCR中还是有许多需要注意的地方
2024-11-09 38 -
引物溶解稀释的方法
干粉引物溶解稀释方法： 收到引物后，在开启离心管盖前在3000-4000转/分钟的转速下离心1分钟，以防开盖时引物干粉散失。引物保存在高浓度的状况下比较稳定。如
2024-11-09 39 -
Folin-酚（福林酚）试剂配方
在2升磨口回流瓶中，加入100克钨酸钠（Na2WO4•2H2O）,25克钼酸钠（Na2MoO4•2H2O）及700毫升蒸馏水，再加50毫升8
2024-11-09 29 -
PCR优化策略
PCR过程中如果没有找到最佳的扩增条件将会导致产生许多不确定的、不需要的产物，有时甚至没有目的产物；而在另一个极端，又可能没有扩增到任何产物。这时改变已知对引物
2024-11-09 35 -
双酶切的一点心得
1、双酶切时如果两种酶反应温度一致而buffer不同时，可查阅内切酶供应商在目录后的附录中提供的各种酶在不同buffer中的活力表，如果有一种buffer能同时
2024-11-09 22 -
PCR技术的基本原理
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成： （1）模板DN
2024-11-09 46 -
PCR技术应用九：HIV感染
八十年代以来由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染而引起的艾滋病(AIDS)因其严重的危害性而受到人们高度重视，力争早期诊断和寻求有效治疗是防止其广泛传播的关键所在.
2024-11-09 24 -
大片段DNA的PCR扩增
一般PCR方法在扩增大片段DNA时的局限性通常所用的PCR方法都在两个方面有局限，即目标产物精确程度和合成片段的大小。Pfu（Pyrococcus furios
2024-11-09 21 -
Real Time PCR 常用试剂使用说明
简单说明:transhold染料法PCR master mixReal Time PCR反应液配制（50μl反应体系，染料法）：使用准备： 引物溶解：先1200
2024-11-09 30 -
克隆长期做不出来，最大的原因是实验习惯不好！
我做不出来克隆的时间长达半年，期间克隆实验方面许多问题都遇到过，现在总结主要的一些问题和大家交流，希望大家以后不要犯我一样的错，少走弯路。1、感受态细菌本身有质
2024-11-09 37 -
PCR扩增DNA
【实验目的】 1.掌握PCR扩增DNA的技术及原理 2.学习PCR扩增仪的使用 【实验原理】 聚合酶链反应（polymerase chain reaction，
2024-11-09 28
