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Real-time PCR实验攻略
北京协和医学院阜外心血管病医院心外科心血管病国家重点实验室吴益和分享实验中必须坚持的一些好习惯1. 加入试剂之前,把它混匀一下,以免放置时间长了浓度不均。2.
2024-11-08 26 -
PCR操作规程及污染的监测与防治
PCR与定量PCR反应最大的魅力是扩增能力与高灵敏度,但易污染一直是困扰各实验室的大问题,极微量的污染就可能造成假阳性反应,破坏实验结果。如何监测与防止PCR污
2024-11-08 27 -
QPCR的基础知识
问:什么是QPCR?答:QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即实时荧光定量核酸扩增检测系
2024-11-08 30 -
real-time PCR技术的原理及应用
一、实时荧光定量PCR原理(一)定义:在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法 。(
2024-11-08 19 -
荧光定量PCR:简介,原理,应用
荧光定量PCR简介 荧光定量PCR检测技术诞生至今已10多年的时间,而其应用一直都没广泛展开,究其原因,无外乎受制于相关仪器、试剂和技术的发展。近期,尤其是08
2024-11-08 19 -
实时荧光定量PCR具体实验步骤
1 样品RNA的抽提①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的氯仿,盖紧管盖。手动剧烈
2024-11-08 34 -
微滴式数字PCR 保护海岸生态系统
Corona Del Mar这个典型的南加州海滩上美好的一天:晴朗的天空万里无云,蔚蓝而清澈的海水泛起层层海浪拍打着白色的沙滩。两位老人漫步在沙滩上,小孩子在他
2024-11-08 23 -
免疫PCR基本概念
免疫PCR主要由两个部分组成,第一部分的免疫反应类似于普通的酶联免疫吸附试验(ELISA)的测定过程;第二部分即通常的PCR检测,抗原分子的量最终由PCR产物的
2024-11-08 22 -
RFLP的操作要点
一、 材料基因组 DNA (大于50kb,分别来自不同的材料)。二、设备电泳仪及电泳槽, 照相用塑料盆5只,玻璃或塑料板(比胶块略大) 4块,吸水纸若干,尼龙膜
2024-11-08 27 -
PCR实验室的建立
一、样品准备区 这个区域专门用作样品的准备,在制备和操作用于核酸提取的试剂时应该采。 取预防措施: 1. PCR产物和带有要扩增序列的DNA克隆不能在这个房间
2024-11-08 22 -
简化SSH法寻找差异表达基因
无论是从一个胚胎细胞分化为不同的组织器官,或者是从正常的组织突变为肿瘤组织,都可能涉及在同一基因组背景下不同基因的差异性表达。寻找差异表达的基因就有可能揭示细胞
2024-11-08 25 -
胰腺癌之殇
乔布斯分别于(第一排左到右)2000、2003、2005、(第二排左到右)2006、2007、2008年的照片,因健康问题明显变瘦。 姓名从诊断到去世时间乔布斯
2024-11-08 23 -
PCR-SSCP[PCR-single strand conformation polymorphism]
PCR是DNA的聚合酶链式反应,SSCP 是单链构象多态性。SSCP一般都要采用PCR扩增的方法进行检测,故名PCR-SSCP。此项技术的原理是,不同序列组成的
2024-11-08 22 -
简化抑制消减杂交(SSH)法--寻找差异表达基因
无论是从一个胚胎细胞分化为不同的组织器官,或者是从正常的组织突变为肿瘤组织,都可能涉及在同一基因组 背景下不同基因的差异性表达。寻找差异表达的基因就有可能揭示细
2024-11-08 21 -
免疫PCR系列四-免疫PCR产物检测及定量技术
(1) 凝胶检测系统用凝胶扫描仪或计算机辅助视频设备对溴化乙锭染色的琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶进行定量,放射性标记的扩增产物可通过放射自显影定量测定,最近用自动DN
2024-11-08 20