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PCR引物设计的原则与要点
DNA 聚合反应(即错配)。 引物设计应注意如下要点： 1 引物的长度一般为15-30 bp，常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度
2024-11-09 64 -
DD-RT-PCR定义是什么？
传统mRNA差异显示技术（DDRT-PCR）是根据绝大多数真核细胞mRNA3'端具有的多聚腺苷酸尾（polyA）结构，因此可用含oligo（dT）的寡聚
2024-11-09 75 -
PCR常见问题及解答
1、PCR产物的电泳检测时间？ 一般为48 h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48 h后带型不规则甚致消失。 2、假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键
2024-11-09 62 -
About LacZ,IPTG and X-Gal
载体操作中最常用的几个概念：1. The lac Z gene may be used as a simple "reporter" gen
2024-11-09 56 -
四步法消除SYBR Green Ⅰ实时定量RT2PCR中引物二聚体
张驰宇1 ,2) , 张高红1 ,2) , 杨 敏1) , 贲昆龙1) 3 (1) 中国科学院昆明动物研究所分子与细胞免疫学实验室,昆明 650223 ;
2024-11-09 68 -
聚合酶链式反应(PCR)扩增
材料、设备及试剂 一、材料 不同来源的模板DNA。 二、设备 移液器及吸头，硅烷化的PCR小管，DNA扩增仪(PE公司)，台式高速离心机。
2024-11-09 70 -
一种新颖简便的荧光实时RT-PCR相对定量方法的建
一种新颖简便的荧光实时 RT-PCR相对定量方法的建立 A Novel and Convenient Relative Quantitative Method
2024-11-09 49 -
基因的PCR扩增（聚合酶链式反应）
实验原理 单链DNA在互补寡聚核苷酸片段的引导下，可以利用DNA聚合酶按5’3’方向复制出互补DNA。这时单链DNA称为模板DNA，寡聚核苷酸片段称为引物（P
2024-11-09 57 -
PCR扩增样本DNA的HLA基因片段
一、PCR扩增体系1. 1.0 uM 引物2. 300 ng 待测样本基因组DNA3. 2.0 U Taq多聚酶4. 200 uM 各种dNTP5. 用1PCR
2024-11-09 59 -
PCR扩增产物的RFLP分析
一、PCR产物用各种限制性核酸内切酶酶解 将PCR扩增产物分装，并用下列不同的限制性核酸内切酶酶切 DR1 ：Ava II，Pst I DR2 ： Fok I，
2024-11-09 55 -
RT中Olig（dT）15引物与随机引物？
RT实验Olig（dT）15引物合成的条带明显优于随机引物，不是随机引物的效果较好吗？怎样解释这种现象网友一回答：Olig（dT）适合于长链甚至全长mRNA的R
2024-11-09 63 -
PCR of Trouble shooting guide
1. 阴性，不出现扩增条带PCR反应的关键环节有：（1）模板核酸的制备。（2）引物的质量与特异性。（3）酶的质量。（4）PCR循环条件。模板：（1）模板中含有杂
2024-11-09 60 -
试验用gelred代替EB，试验不理想，求助！！
问：实验室最近用gelred代替EB，我是直接把gelred稀释到6X Loading Buffer 中，2ml上样缓冲液加分别加入1微升，2微升--10微升的
2024-11-09 49 -
双酶切连接反应的经验谈
1、 在双酶切载体时如果2个酶切位点靠得很近，必须注意酶切顺序。因为有的限制性内切酶要求其识别序列的两端至少保留有若干个碱基才能保证酶的有效切割。有的酶要求识别
2024-11-09 60 -
免疫PCR要点与注意事项
一、免疫PCR要点（1）连接分子免疫PCR需要适当的连接分子连接报告分子和抗原抗体复合物。1 992年Sano用重组的链亲和素-蛋白A嵌合体作为连接分子，创立了
2024-11-09 49
