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  • PCR扩增分离目的DNA片段实验原理、材料和步骤

    PCR扩增分离目的DNA片段实验原理、材料和步骤

    一、目的了解多聚合酶链反应DNA 扩增技术的基本原理和实验应用,掌握PCR反应基本技术。二、原理PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚

    2024-11-09 70
  • PCR基因扩增原理及方法步骤

    PCR基因扩增原理及方法步骤

    实验概要PCR扩增目标DNA片段。实验原理多聚酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特

    2024-11-09 71
  • 实时荧光定量PCR原理和实验

    实时荧光定量PCR原理和实验

    无论是对遗传病(如地中海贫血和血友病)、传染病(如肝炎和艾滋病)或肿瘤进行基因诊断,还是研究药物对基因表达水平的影响,或者监控药物和疗法的治疗效果,定量PCR技

    2024-11-09 74
  • 影响PCR 结果的因素

    影响PCR 结果的因素

    1. 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。设计引物应遵循以下原则:(1)引物长度: 15-30 bp,常

    2024-11-09 83
  • 酶切位点保护碱基-PCR引物设计用于限制性内切酶

    酶切位点保护碱基-PCR引物设计用于限制性内切酶

    本文给出了分子克隆中常用限制性内切酶的保护碱基序列,如AccI,AflIII,AscI,AvaI,BamHI,BglII,BssHII,BstEII,BstXI

    2024-11-09 66
  • PCR反应条件如何选择?

    PCR反应条件如何选择?

    PCR反应条件为温度、时间和循环次数。温度与时间的设置:基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95

    2024-11-09 69
  • PCR 扩增常见问题及特点

    PCR 扩增常见问题及特点

    PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚至消失。假阴性,不出现扩增条带。PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备

    2024-11-09 61
  • PCR一般步骤

    PCR一般步骤

    (一)总RNA提取取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中,按100g:3ml的比例加入Trizol试剂,严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。 (1)

    2024-11-09 66
  • HindIII和Bamh1酶切位点保护碱基的详解

    HindIII和Bamh1酶切位点保护碱基的详解

    用于基因工程的工具酶一,限制性内切酶(Endonucleosase)(一)限制性内切酶(Endonucleosase)的发现与分类1) 50年代初发现细菌能将外

    2024-11-09 66
  • 7年分子克隆经验总结

    7年分子克隆经验总结

    做了快7年的分子克隆,从加样加不好,到现在轻松PCR,我想分子生物学这块还是有很多经验可以分享一下的。或许很多人会说分子克隆过程中出现问题最多的大概就是连接了,

    2024-11-09 46
  • 巢式PCR(Nested PCR)定义、原理和步骤

    巢式PCR(Nested PCR)定义、原理和步骤

    巢式PCR的定义巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应(PCR),使用两对(而非一对)PCR引物扩增完整的片段。第一对PCR引物扩增片段和普通 PCR相似。第二对引

    2024-11-09 74
  • Overlap PCR(重叠PCR)的基本原理

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    Overlap PCR(重叠PCR)重叠PCR的应用是非常广泛的,他的原理其实很简单:比如说有两个基因或者说一个启动子和一个基因,你要将他们连接到一 起,我们首

    2024-11-09 82
  • RT2 Profiler PCR Arrays新手小技巧及注意事项

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    以下是做了几百次PCR Array的Matt Finley博士的经验之谈:RNA纯化和分析:起始RNA样品的质量是成功实验的最重要的因素之一。我强烈推荐使用QI

    2024-11-09 55
  • 转基因大米中Bt基因检测

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    2014 年7 月,央视日前报道了湖南、湖北、安徽、福建等4省存在转基因大米的新闻,引发社会极大关注。记者在武汉市一家大型超市,随机购买5种大米。经检测后发现,

    2024-11-09 60
  • PCR操作时应注意的事项

    PCR操作时应注意的事项

    PCR检测微量感染因子时,容易因为污染的而导致各种问题,因此,进行PCR操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的

    2024-11-09 74