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凝胶柱的清洗问题
问:最近在回收凝胶柱时(用的是镍柱),经过多次的洗脱液继续平衡清洗,发现还有一些很难去除的杂蛋白,不知应该用什么方法把这些难除的杂蛋白去除?答:一般用6M盐酸胍
2024-11-25 72 -
凝胶过滤填料的分离范围表
SephadexG-10葡聚糖凝胶 G-10 分离范围<700 适用于脱盐、肽与其它小分子的分离Sephadex G-15 葡聚糖凝胶 G-15 分离范围
2024-11-25 78 -
Chromatin Immunoprecipitation(ChIP)实验指南及技术总结
ChIP是一项比较流行的研究转录因子( transcription factor, TF)与启动子(promoter)相互结合的实验技术。由于ChIP采用甲醛固
2024-11-25 412 -
天然蛋白的免疫共沉淀方法详解
本方法免疫沉淀得到的天然蛋白可用于 western 免疫印迹或是激酶活性分析所需溶液和试剂注意:所有溶液用反渗透去离子水(Reverse Osmosis Dei
2024-11-25 104 -
免疫沉淀反应(一)——环状沉淀反应
当抗原与相应抗体形成一个接触面时,如二者比例适当,接触面上可形成一个乳白色的环状物即为阳性沉淀反应。一、材料(1)免疫血清:免疫兔抗人血清。(2)抗原:人血清。
2024-11-25 263 -
免疫共沉淀简介
免疫共沉淀(Co- Immunoprecipitation, Co-IP)是利用抗原和抗体的特异性结合以及细菌的Protein A或G特异性地结合到免疫球蛋白的
2024-11-25 129 -
免疫共沉淀的具体注意事项
免疫共沉淀(co-immunoprecipitation)是以抗体 和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内
2024-11-25 105 -
变性蛋白的免疫共沉淀方法详解
免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法,是确定两种蛋白质在完整细胞内生
2024-11-25 155 -
免疫共沉淀实验步骤
免疫共沉淀样品制备:1. 电转染CO-IP质粒入60 cm2 培养瓶,表达48h;2. 吸干培液;3. 加入预冷的RIPA Buffer(0.5ml/60 cm
2024-11-25 142 -
实战指南——免疫共沉淀篇(进阶)
一、IP前的准备工作:coIP:分为内源性蛋白的相互作用和非内源性蛋白相互作用(后者包括外源蛋白之间以及外源拖内源蛋白)。非内源性蛋白的相互作用,主要是通过过表
2024-11-25 106 -
免疫共沉淀(Co-IP)详细步骤教程
一、原理:免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完
2024-11-25 126 -
蛋白质二级结构预测-Chou-Fasman预测方法
Chou-Fasman方法是一种基于单个氨基酸残基统计的经验参数方法,由Chou和Fasman在20世纪70年代提出来。通过统计分析,获得的每个残基出现于特定二
2024-11-25 142 -
基于蛋白质物理性质的蛋白质预测软件
ExPASy工具包包涵的程序ComputepI/MW:是ExPASy工具包中的程序,计算输入序列等电点和分子量的工具。对pI的确定基于早期研究中将蛋白质从由中性
2024-11-25 181 -
蛋白质三级机构(空间结构)预测-从头预测法
从头预测模型的基本思想在既没有已知结构的同源蛋白质、也没有已知结构的远程同源蛋白质的情况下,上述两种蛋白质结构预测的方法都不能用,这时只能采用从头预测方(Abi
2024-11-25 100 -
蛋白质二级结构预测的发展及局限性
蛋白质二级结构的预测开始于20世纪60年代中期。二级结构预测的方法大体分为三代,第一代是基于单个氨基酸残基统计分析,从有限的数据集中提取各种残基形成特定二级结构
2024-11-25 114