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蛋白质的检测与分析――Western blot 操作步骤
蛋白质的检测与分析――Western blot 操作步骤一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志,检测蛋白质的方法
2024-11-25 87 -
蛋白质转印法
蛋白质经SDS-PAGE后,胶片浸入转印缓冲液,蛋白质可被转印到硝化纤维纸(nitrocellulose) 上,先经尿素洗去SDS,并使蛋白质回复原态抗原性,可
2024-11-25 68 -
蛋白质免疫印迹(Western Blot )-底物化学发光 ECL 法
蛋白质免疫印迹(Western Blot )可以:(1)从蛋白质混合物中检出目标蛋白质;(2)定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况;(3)用于蛋白质-蛋白
2024-11-25 85 -
多肽的固相合成、切割及纯化
固相肽合成(solid phase peptide synthesis, SPPS)技术是现代蛋白质化学的一项关键技术,也是对现代分子生物学和基因工程研究具有重
2024-11-25 90 -
蛋白质印迹法中为什么检测不到目的蛋白?
很多小伙伴在对胶片印迹进行短暂曝光后,检测不到目的蛋白。可从以下几个方面来优化实验步骤:1、裂解物制备每道全细胞提取物的 20–30 µg 总蛋白,通常足够用来
2024-11-25 149 -
如何选择实验抗体(一抗的选择原理及方法)?
检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,在同一个抗体公司,可能会有好几种,甚至好几十种;在不同的抗体公司,那就更多了。那怎样在琳琅满目的抗体中,选择自己实验
2024-11-25 196 -
升级Western blot可以同时检测大量蛋白
来自芝加哥大学癌症生物研究所,本-梅癌症研究中心等处的研究人员发明了一种能同时检测大量蛋白的新方法,彻底改变目前我们进行癌症和其它疾病蛋白表达水平检测的技术面貌
2024-11-25 67 -
血浆蛋白质测定
临床生化检验中测定蛋白质的方法很多,主要利用蛋白质的分子组成,结构或性质进行。 一、测定蛋白质特征元素 —— 氮 如凯氏定氮法,是测定蛋白质的经典方法,1
2024-11-25 82 -
蛋白免疫印迹技术
免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(western blot),它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。western
2024-11-25 87 -
Electrophoretic Mobility Shift Assay--电泳迁移率检测
凝胶迁移或电泳迁移率检测(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA)是一种检测蛋白质和DNA序列相互结合的技术,最初用
2024-11-25 83 -
提高蛋白质的稳定性
葡萄糖异构酶(GI)在工业上应用广泛,为提高其热稳定性,朱国萍等人在确定第138位甘氨酸(Gly138)为目标氨基酸后,用双引物法对GI基因进行体外定点诱变,以
2024-11-25 83 -
western blot试验心得
前两天做了一个western blot,现在把试验中的一点小小的体会发上来,与大家交流,希望大家多多指点! 1 本实验室采用的脱脂奶粉已经存放了近两年了,虽然是
2024-11-25 62 -
KLRG1四聚物的合成方法
杀伤细胞凝集素样受体G1期( KLRG1 )是II型跨膜糖蛋白抑制性受体,属于C型凝集素样家族。KLRG1以单体和二硫键连接的二聚体形式存在。KLRG1四聚体可
2024-11-25 67 -
溶菌酶的制备、纯化和鉴定原理和方法
实验概要 制备、纯化和鉴定溶菌酶实验原理溶菌酶,全称为1,4-β-N-溶菌酶,又称粘肽N-乙酰基胞壁酰水解酶,属于α-乳白蛋白家族。人们对溶菌酶的研究始于上世纪
2024-11-25 72 -
GST-pulldown操作流程
实验目的:体外检测蛋白质与蛋白质之间相互作用。用于验证两个已知蛋白的相互作用,或者筛选与已知蛋白相互作用的未知蛋白。实验原理:利用重组技术将探针蛋白与GST(G
2024-11-25 167