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PCR拖尾及假阳性的原因及对策
一、拖尾现象：产物在凝胶上呈Smear状态。原因：1.模板不纯2.Buffer不合适3.退火温度偏低4.酶量过多5.dNTP、Mg2+浓度偏高6.循环次数过多对
2024-11-16 82 -
标准的PCR实验室简介
1.主体结构主体为彩钢板、铝合金型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝，从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。结构牢固，线条简明，美观大方，密封性好
2024-11-16 109 -
PCR技术综述
前言一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这
2024-11-16 89 -
PCR检测的质量控制
随着兽医防疫工作重要性的逐步提高，PCR检测技术已被兽医工作者比较广泛认可，已经从实验室研究走进了临床应用阶段。如何提高PCR检测质量，已成为实验室技术人员不可
2024-11-16 195 -
没有P的qPCR
qPCR中的P代表什么？Polymerase，聚合酶。如果qPCR少了聚合酶，你一定觉得这是在开玩笑，巧妇难为无米之炊，没有聚合酶，定量PCR还怎么做。一直以来
2024-11-16 77 -
关于PCR假阴性问题的总结
PCR的假阳性问题深受重视，但PCR假阴性问题相对于临床检测更为严重。其实PCR假阳性的问题是比较单纯的，一般仅涉及污染和引物的非特异性问题。而污染可以通过严格
2024-11-16 87 -
引物溶解稀释方法
在实验室进行分子克隆实验时，经常需要合成大量的引物，而这些合成的引物首先要进行适当的稀释才能使用。如果不稀释就使用引物，往往造成引物的浪费和过早的活性丧失，更有
2024-11-16 104 -
PCR常见问题分析及对策(无扩增产物、非特异性扩增、拖尾、假阳性)
问题1：无扩增产物现象：正对照有条带，而样品则无原因:1、模板:含有抑制物，含量低2、Buffer对样品不合适3、引物设计不当或者发生降解4、反应条件：退火温度
2024-11-16 96 -
如何增加PCR特异性
引物设计细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的指导
2024-11-16 96 -
PCR实用大全
PCR引物设计的11条黄金法则一、引物最好在模板cDNA的保守区内设计。DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因，
2024-11-16 104 -
反转录PCR （RT―PCR, Reversed Transcript PCR）
1 原理 RT—PCR是一种将cDNA合成与PCR技术结合分析基因表达的快速灵敏的方法，主要用于对表达信息进行检测或定量分析,还可以用来检测基因表达差异而不
2024-11-16 127 -
引物设计常见问题与解答(一)
1. 引物是如何合成的？目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种， 主要都是由ABI/PE 公司生产，无论采用什么机器合成，合成的原理都相同
2024-11-16 102 -
PCR实验中DNA聚合酶的选择及实验方法
一、 DNA聚合酶的选择实验室常用 DNA聚合酶有三种：TaKaRa TaqTM，TaKaRa EXTaqTM和 PyrobestTMDNA Polymeras
2024-11-16 118 -
PCR临床应用领域及特点
一、PCR应用特点1、操作简便目前PCR技术采用耐高温Taq DNA聚合酶，并且在有电脑控制的DNA扩增仪中进行，使操作大为简化，一次加入的酶即可满足反应全过程
2024-11-16 116 -
PCR引物设计及相关软件使用
主要内容：背景PCR引物设计原则常用PCR引物设计软件Primer Premier 5.0 介绍Oligo 6.22 介绍在线Primer3 介绍一、PCR聚合
2024-11-16 202
