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大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验（离心法）
材料与仪器病毒细胞小牛血清滤器 转子步骤1. 将产病毒细胞按1：10或1：20从刚生长汇片的细胞分传至20~50个10 cm 培养皿中，培养细胞至50%~90
2024-06-08 31 -
反转录病毒原液检测实验（在Tris-Tricine缓冲系统中电泳）
材料与仪器蛋白质Tricine样品缓冲液 考马斯亮蓝染色液 乙酸电泳仪 离心机步骤1. 按“Laemmli凝胶电泳法”的步骤1~7，配制溶液并灌制分离胶和积层
2024-06-08 33 -
反转录病毒原液检测实验（反转录酶分析法）
材料与仪器病毒SSC 乙醇滴定板 滤纸 离心机步骤1. 加50 μl RT反应混合物于96-孔微量滴定板的各孔中。每个待测或对照样品占一孔。加10 μl 病毒
2024-06-08 29 -
反转录病毒原液检测实验（通过药物抗性的水平传播分析）
材料与仪器病毒细胞polybrene 小牛血清 DMEM培养皿 滤膜步骤1. 在开始分析的前1天，按1：50将NIH 3T3细胞分传于3个6 cm 培养皿中。
2024-06-08 32 -
克隆化基因的体外转录和翻译实验基本方案
材料与仪器DNATE 核苷三磷酸混合液 RNA聚合酶缓冲液 异丁醇 NaOH TCA离心机 摇床步骤1. 亚克隆编码蛋白质的目的DNA片段于质粒载体的SP6或
2024-06-08 33 -
辅助方案（细胞核提取方法的优化）
材料与仪器细胞核KCl 高盐缓冲液透析膜 离心机步骤1. 按基本方案中歩骤1~7操作。 2. 将细胞核悬液分成5等份。在冷室内不断搅拌，按如下方法在每份悬液
2024-06-08 41 -
核提取物的制备
原理通过向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后，可以降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析，是物理变化，可复原。对于特定的蛋白质，影响
2024-06-08 35 -
酶切片断的脱磷实验基本方案
材料与仪器DNA片段碱性磷酸酶 酚 氯仿 EDTA SDS TE缓冲液 电泳缓冲液 NH4AC离心机 恒温设备 真空干燥机 取液器步骤1. 在实验四所得DNA
2024-06-08 32 -
噬菌体铺平板产生噬斑实验（连续稀释法）
原理这种方法能从单个噬斑中分离出纯的噬菌体部落，而且可以对噬菌体母液进行浓度测定。材料与仪器大肠杆菌麦芽糖 培养基平板 微波炉 试管 加热器 毛细管步骤1.
2024-06-08 45 -
多重序列比对及系统发生树的构建实验
原理在现代分子进化研究中，根据现有生物基因或物种多样性来重建生物的进化史是一个非常重要的问题。一个可靠的系统发生的推断，将揭示出有关生物进化过程的顺序，有助于我
2024-06-08 35 -
Sephacryl S-1000 层析法去除质粒 DNA 制备物中的小片段核酸
原理Sephacryl S-1000 层析是一个可供选择的将质粒 DNA 与小分子核酸（DNA 和 RNA ) 分离的方法。这一方法由波士顿麻省总医院的 F.D
2024-06-08 34 -
在质粒载体中进行定向克隆实验
原理大多数常用质粒都含有可被不同内切酶识别的多克隆位点。由于可供选择的克隆位点很多 [ 如 Invitrogen 公司的 PSE280 质粒的克隆位点有 46
2024-06-08 31 -
在凸出末端上连接接头实验
材料与仪器T4 噬菌体 DNA 连接酶 多聚核苷酸激酶 限制性内切核酸酶ATP 乙醇 接头激酶缓冲液 苯酚 氯仿 乙酸钠 TE层析设备 水浴装置步骤一、材料1.
2024-06-08 27 -
制备和转化感受态大肠杆菌的Hanahan方法实验（高效的转化策略）
原理20 世纪 70 年代晚期和 80 年代早期，Dong Hanahan 在冷泉港实验室和哈佛大学做研究生的时候，他做出了以前从未听说过的转化效率，并且在以后
2024-06-08 48 -
双脱氧链终止法测序用变性模板的制备实验
材料与仪器乙酸铵 氯仿 异戊醇 DMSO 乙醇 NaOH酚 测序反应缓冲液 琼脂糖凝胶 寡核苷酸引物 闭环双链质粒 DNA干冰-乙醇浴 65C 水浴步骤材料缓冲
2024-06-08 34
