-
横向交变场的脉冲场凝胶电泳
原理Gardiner 等（1986; Gardiner and Patterson 1989) 使用置于垂直凝胶两侧的两组铂线电极的凝胶电泳装置以分离大的 DN
2024-06-01 34 -
箝位匀强电场的脉冲场凝胶电泳
原理箝位匀强电场（contour-clamped homogeneous electric field, CHEF) 凝胶电泳中， 电场是由多个电极产生的。这些
2024-06-01 45 -
哺乳动物 DNA 的快速分离
原理根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 kb，适于作 PCR 反应的模板。DNA 产量在 0.5 到 3.0 μg/mg 组织之间变化，或者是 5
2024-06-01 33 -
Southern印迹(DNA从一块琼脂糖凝胶上同时向两张膜转移)
原理DNA 可以同时从琼脂糖两面向两张膜上转移。当需要用两种不同的探针分析相同的限制性内切核酸酶酶切片段时，这种方法是很有用的。DNA 片段转移速率较快，但是由
2024-06-01 28 -
用酸性酚-硫氰酸胍-氯仿提取法纯化组织和细胞中的 RNA
原理在提取过程的第一阶段细胞的 RNA 酶应尽快灭活。一旦内源的 RNA 酶被破坏，RNA 受损的可能就大大降低，而纯化的过程就可以按合适的速度进行。材料与仪器
2024-06-01 30 -
oligo(dT)-纤维素层析法提取poly(A) + RNA
原理与 rRNA, 5SRNA, 5.8 SRNA 和 tRNA 相比，大多数真核生物的 mRNA 在其 3' 端带有 poly(A) 尾巴。因此，mR
2024-06-01 29 -
批量层析方法筛选 poly (A)+ RNA
原理当处理许多 RNA 样品或处理小量的哺乳动物总 RNA 时（<50 μg)，可选择用 oligo (dT) —纤维素进行批量层析的方法。这种方法采用级
2024-06-01 28 -
核糖核酸酶保护(用核糖核酸酶和放射性标记的RNA探针对RNA作图)
原理核糖核酸酶保护分析用于度量特异性 mRNA 的丰度以及为它们的拓扑异构特征作图。这种方法包括测试 RNA 与互补的放射标记的 RNA 探针（核糖探针）杂交，
2024-06-01 29 -
用引物延伸法进行 RNA 的分析
原理引物延伸法主要用于 mRNA5' 末端作图。poly (A) + RNA 先与过量 5' 末端标记的且与靶 RNA 互补的单链寡核苷酸引物杂
2024-06-01 36 -
聚合酶链式反应
原理材料与仪器热稳定 DNA 聚合酶 旁观者 DNA 正向引物 反向引物 模板 DNA扩增缓冲液 氯仿 dNTP 贮存液聚丙烯酰胺凝胶或琼脂糖凝胶 屏蔽型枪头
2024-06-01 22 -
通过PCR扩增在扩增DNA产物末端引入限制性核酸内切酶酶切位点
原理材料与仪器噬菌体 T4 DNA 连接酶 限制性内切核酸酶 靶 DNA氯仿 EDTA 乙醇 酚 氯仿 乙酸钠 TE琼脂糖凝胶 水浴箱步骤一、材料1. 缓冲液与
2024-06-01 29 -
应用 PCR 的遗传工程
原理本方案（由德克萨斯大学西南医学中心的 Andereson 提供）叙述在克隆化的哺乳动物 cDNA 的 5‘ 与 3‘ 端同时导入限制性内切核
2024-06-01 26 -
应用mRNA反转录扩增cDNA（RT-PCR）
原理酶促催化使RNA反 转 录 为cDNA第一链。 一 条寡聚脱氧核苷酸引物先 与 mRNA杂交，然 后 由RNA依赖的DNA聚合酶催化合成相应互补的cDNA拷
2024-06-01 28 -
cDNA 5’末端的快速扩增（5’-RACE）
原理在分子克隆中没有比分离缺乏相应的 mRNA 5‘ 末端的序列特征结构的 cDNA 克隆更易失败的了。通常存在于 cDNA 基因文库中的部分克隆，由于
2024-06-01 25 -
cDNA 3'末端的快速扩增（3’-RACE)
原理在用 oligo (dT) 引物构建的 cDNA 文库中，偶而发生部分 cDNA 克隆缺失了与靶 mRNA 3‘ 末端互补的序列。这部分序列到底是在
2024-05-30 49
