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应用混合寡核苷酸引物引导的cDNA扩增（MOPAC）
原理对于仅仅知道某种蛋白质的部分序列，而要克隆其基因的最佳方法是，利用已知氨基酸序列设计相应的寡核苷酸，用此寡核苷酸作为探针去筛选基因文库钓取全长基因或者用寡核
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随机引物法(利用寡核苷酸延伸法标记DNA放射性)
原理利用寡核苷酸作引物，DNA 聚合酶可沿单链模板起始 DNA 的合成（Gotilian 1969)。如果寡核苷酸的序列不均一，它们就可在模板的多位点上与模板杂
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随机引物法（在融化琼脂糖存在下利用随机寡核苷酸延伸进行DNA的放射标记）
原理此法系可用于从低熔点琼脂糖凝胶中回收 DNA 的放射性标记 ( Feinberg 和 Vogelstein 1983，1984)。材料与仪器大肠杆菌 DNA
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利用聚合酶链反应制备放射性标记的DNA探针
材料与仪器耐热的 DNA 聚合酶 模板 DNA乙酸铵 扩增缓冲液 氯仿 乙醇 TE dCTP dNTP 溶液屏障吸头 微量离心管 正向置换进样器 Sephade
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用大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段标记双链DNA的3’端
材料与仪器限制性内切核酸酶 大肠杆菌 DNA 聚合酶 I Klenow 片段 模板 DNA乙酸铵 乙醇 dNTP 溶液Sephadex G-50 离心柱 水浴步
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用[α-32P] 3'脱氧腺苷5'-三磷酸或[α-32P]双脱氧ATP末端标记双链DNA的3'突出端
材料与仪器限制性内切核酸酶 小牛胸腺末端转移酶 模板 DNA乙酸铵 乙醇 酚 氯仿 末端转移酶缓冲液Sephadex G-50 离心柱步骤一、材料1. 缓冲液和
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差异显示实验
材料与仪器无菌玻璃器皿 无菌 Eppendorf试 管 Eppendorf枪头 无菌 falcon离心管4 mol L 异硫氧酸胍RNA提取试剂盒 Eppend
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基因表达的系列分析实验
材料与仪器玻璃及塑料器皿溶液与缓冲液 引物试剂盒 MPC-E PCR仪 Gene PulserII 型系统步骤一、一般原则若用于 SAGE 的 RNA 有足够的
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结合磁珠实验
材料与仪器磁珠Dynabead M-280链霉抗生物素磁设备步骤实验方案 A振荡 lmin 以使 Dynabead M-280 链霉抗生物素重新成为混悬液。将
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cDNA文库的构建和筛选 —在外界环境压力条件下，新表达基因的鉴定方法实验
材料与仪器步骤一、材料所有化学试剂均为分子生物学级纯度。所用塑料和玻璃制品，包括瓶子和移液器吸头均经高压蒸气灭菌。涉及核酸的操作均需带手套。1.总 RNA提取（
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培养神经元原位杂交技术实验
原理流程图材料与仪器溶液和缓冲液 原位杂交RNA 聚合酶 地高辛-UTP 标记混合物步骤一、制备地高辛标记的探针将 cDNAs 克隆入 pBluescript
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电镜原位杂交技术实验
原理从理论上讲，前包埋原位杂交技术的敏感性高于后包埋原位杂交技术，因为前者可观察到来自整个切片厚度的信号。但是，探针并不一定能穿透整个切片厚度，特别是用较长的探
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离体神经突触的代谢性标记实验
材料与仪器固定剂 温育液 氯霉素 放射自显影乳剂 显影剂 SDS样本缓冲液步骤一、放射自显影神经元在条件培养基中培养 2d，如第十章所述。1.用一个锋利的微电极
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mRNA 的细胞内注射实验
材料与仪器步骤一、用于细胞内注射的加帽 mRNA 的制备材料步骤1.依次加入下列物质，终体积为 20ul，冰上操作：2.37℃ 温育 lh。3.加入 Iul D
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彗星实验在环境毒理学中的应用实验
材料与仪器步骤一、材料1.溶液1.2 玻璃器具和实验器材（1） 移液器。（2） 吸 头（10、 20、 100、 200、 1000 uL)。（3）刻 度 烧
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