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RT-PCR引物的选择
随机引物适用于长的或具有发卡结构的RNA.适用于rRNA、mRNA、tRNA 等所有RNA的反转录反应。主要用于单一模板的RT-PCR反应。Oligo dT适用
2024-11-12 76 -
RT-PCR实验方法简介
RT-PCR定义:是指对组织或细胞的总RNA进行抽提,把RNA反转录为cDNA,然后设计目的基因引物进行PCR,琼脂糖电泳并数码拍照,分析电泳条带灰度值,判断目
2024-11-12 84 -
最新的GoTaq®两步法RT-qPCR系统
凭借新的GoTaq®两步法RT-qPCR系统,Promega提高了RNA定量的灵敏度 Madison, WI USA. (2010年8月10日) Promega
2024-11-12 69 -
RT-PCR在基因表达(gene expression)检测中的应用
基因表达的检测方法基因表达的检测有几种方法。经典的方法(仍然重要)是根据在细胞或生物体中 所观察到的生物化学或表型的变化来决定某一特定基因是否表达。随着大分子分
2024-11-12 72 -
实时荧光定量PCR
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增。在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对
2024-11-12 74 -
逆转录-聚合酶链反应实验方法
逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理是:提取组织或细胞中
2024-11-12 72 -
RNA 提取策略及RT-PCR技术
第一部分RNA 提取策略1、RNA降解的原因内源性RNAase是造成RNA降解的最重要原因,因为人体细胞自身就是几十分钟(20min?)mRNA被降解一轮,所以
2024-11-12 67 -
RT-PCR实验步骤
实验材料:水稻叶片的 RNA 。实验原理:目前 PCR 技术只能扩增 DNA 模板,对 RNA 模板不能直接扩增。mRNA反转录生成的 cDNA 可作为 PCR
2024-11-12 67 -
逆转录(RT)实验步骤
一、准备工作1、实验器具与材料:(1)移液枪:200ul、10ul(2)吸头:200ul、20ul(3)EP管1。5ml、100ul(4)水浴箱2、实验器具的处
2024-11-12 83 -
RT-PCR步骤
总RNA提取1. 取200mg组织,放到1.5ml EP管中,加入1ml Trizol剪碎。2. 震荡30s。3. 加0.2ml氯仿,剧烈摇动30s,室温3mi
2024-11-12 65 -
ROX Standard
The final working concentration of ROX Standard in the PCR buffer is 0.5 µMolar
2024-11-12 56 -
Amplification and Labelling with Cy dyes
1.Two rounds of DNA synthesis to incorporate fixed sequencesPrepare the followin
2024-11-12 55 -
Protocol for Annealing Oligonucleotides
1. Prepare a solution of 10X annealing buffer. 10 mM MgCl2 , 200 mM Tris-HCl,
2024-11-12 69 -
临床拭子标本DNA PCR反应模板的制备
此方法适用于各种拭子标本(鼻、咽、口腔和生殖道等)中DNA的快速制备。试剂与配制PBS-2Fungi-Bact液;生理盐水;无水乙醇;TE缓冲液;钾缓冲液:50
2024-11-12 74 -
PCR技术在骨肿瘤研究中的应用
1、在骨肿瘤发病机理研究中的应用骨恶性肿瘤是多种癌基因多阶段多途径协同作用的结果,到目前为止,发现与骨恶性肿瘤密切相关的癌基因有K-ras、c-fos、proα
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