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质粒的酵母直接转化
试验试剂：PLATE溶液： iZN ；40％聚乙二醇（PEG，分子量3350；Sigma P 3640）；0.1mol/L 醋酸锂 g；10 mmol/L Tr
2024-09-19 70 -
用CaCl2处理制备新鲜的大肠杆菌感受态细胞
1. 从37℃培养16~20 h 的新鲜平板中挑取一个单菌落（如大肠杆菌DH52），或1 ml 新鲜的16~20 h过夜培养物，转到一个含有100ml LB培养
2024-09-19 74 -
真核转染
一些真核蛋白在原核宿主细胞中的表达不但行之有效而且成本低廉，然而许多在细菌中合成的真核蛋白或因折叠方式不正确，或因折叠效率低下，结果使得蛋白活性低或无活性。不仅
2024-09-19 88 -
感受态细胞制备/转化
摘要： 人工构建的质粒缺乏转移必需的基因,不能自行完成从一个细胞到另一个细胞的接合转移.这时就需要诱导受体细菌产生一种短暂的感受态以摄取外DNA.质粒制备的必要
2024-09-19 85 -
基因转染技术介绍
常用的基因转染技术是将外源基因导入靶细胞需要一定的载体和导入方法，基因转技术则是将纯化的含有靶基因的质粒DNA送入细胞内，并在细胞内表达。转染方法有多种，根据不
2024-09-19 92 -
Cos-1细胞暂时转染
Note: This protocol has been optimized for Cos-1 cells. Successful transfection
2024-09-19 73 -
酵母的高效转化
摘要： 酵母高效转化的实验方法.1、接种5ml液体YPAD或10ml SC,30℃下 振荡 培养过夜.2、计数过夜培养物细胞密度,以最终5106个/ml的细胞密
2024-09-19 73 -
高效感受态细胞制备
方法一：效率非常高，一般可到10*8，好时可到10*9，特别适宜于大片段与文库构建及珍贵材料的连接转化。实验试剂：A液：1M，MnCl2B液：1M，HEPES，
2024-09-19 94 -
一种高效的胚胎干细胞转染方法
文章作者介绍了一种基于脂质体的高效siRNA转染方法。利用该protocol，可以在CCE细胞达到98%的转染效率，在D3细胞达到80%的转染效率，并且对干细胞
2024-09-19 81 -
用体内电穿孔术对哺乳动物骨骼肌细胞进行DNA转染
详细描述了进行成年小鼠趾短屈肌和骨间肌纤维DNA转染时的体内电穿孔术。要想有较高的转染效率，必须严格按照要求的步骤进行。 0:00 用体内电穿孔术进行哺乳动物骨
2024-09-19 69 -
感受态细菌的使用
一、对于感受态细菌效率的测定或连接产物的转化(其它如基因突变产物的转化等参考连接产物进行)：1. 在冰上缓慢融解感受态细菌(对于新鲜制备的感受态就可以直接使用了
2024-09-19 199 -
细菌的转化与平板筛选
摘要： 本实验介绍了细菌的转化与平板筛选的原理及操作步骤。实验原理感受态是指 细菌 处于容易吸收外源 DNA 的状态。转化是指质粒DNA或以它为载体构建的重组子
2024-09-19 100 -
感受态细胞的转化实验流程
1. 取 100μl 感受态细胞于冰浴上融化。2. 加入 1μl 纯质粒或连接产物，轻轻吹打混匀，冰浴 30 min。3. 将菌液放入 42℃水浴中热激 90
2024-09-19 115 -
各种转染方法比较
转染方法 原 理 主要 应用 特 点DEAE－葡聚糖法 带正电的DEAE-葡聚糖与核酸带负电的磷酸骨架相互作用形成的复合物被细胞内吞 瞬时转染相对简便、重
2024-09-19 82 -
DEAE-葡聚糖转染法
DEAE-葡聚糖介导的转染，其原理还不清楚，可能是通过内吞噬作用而使DNA转导进入细胞核，此法只适合暂时转染实验，转染效率与DEAE-葡聚糖浓度以及细胞与DNA
2024-09-19 93
