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  • 转染实验的注意事项

    转染实验的注意事项

    将制备好的siRNA,siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种:1.磷酸钙共沉淀将氯化钙,RNA(或DNA)和磷酸缓冲液混合,沉淀形成包

    2024-09-19 102
  • 细胞瞬时转染

    细胞瞬时转染

    原理:通过脂质体介导转染法及电穿孔等基因转染技术,将靶基因导入细胞,一般在转染后48小时左右,靶基因即可在细胞内表达。根据不同的实验目的,48小时后即可进行靶基

    2024-09-19 100
  • 大肠杆菌电转化感受态细胞制备及转化方法

    大肠杆菌电转化感受态细胞制备及转化方法

    摘要: 本文主要介绍了大肠杆菌电转化感受态细胞制备及转化方法.第一天: 1. 将适合菌株(如XL1-Blue, DH5α)置于LB或其他营养丰富的 培养基 上,

    2024-09-19 89
  • 重组质粒的转化、筛选和鉴定操作

    重组质粒的转化、筛选和鉴定操作

    摘要: 学习克隆工作中最常用的双酶切,将外源基因与质粒连接方法及操作技术.一、实验目的:1、学习克隆工作中最常用的双酶切;2、学习将外源基因与质粒连接方法及操作

    2024-09-19 84
  • 瞬时转染分析研究的步骤

    瞬时转染分析研究的步骤

    1.瞬时转染分析法目前有很多功能性分析方法用于研究转录调控,最常用的方法是瞬时转染分析法。该方法是通过一定的转染程序将含目的调控区的质粒导人培养细胞。在典型情况

    2024-09-19 103
  • 转染细胞的稳定筛选

    转染细胞的稳定筛选

    1.确定抗生素作用的最佳浓度: 不同的细胞株对各种抗生素有不同的敏感性,因此在筛选前要做预试验,确定抗生素对所选择细胞的最低作用浓度。① 提前 24 小时在 9

    2024-09-19 71
  • 重组子的筛选和鉴定

    重组子的筛选和鉴定

    PCR 鉴定重组子重组子可通过酶切进行鉴定,也可以利用扩增引物通过 PCR 进行鉴定,阳性重组子能切出所需要的片段或得到相应片段的 PCR 产物。1. 用牙签挑

    2024-09-19 110
  • 各种感受态细胞的区别、用途和特征

    各种感受态细胞的区别、用途和特征

    摘要: 本文主要介绍了各种感受态细胞的区别、用途和特征.Xl1-Blue菌株 基因型: endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1

    2024-09-19 83
  • 你可能提过很多质粒 却不一定知道这些

    你可能提过很多质粒 却不一定知道这些

    经常提质粒吗?熟练之后,提质粒乃至质粒构建都很简单。但如果真问起一些质粒的细节,可能很多人回答不了。不信随我看看。质粒组成要素一个合格的质粒含有以下组成部分:复

    2024-09-19 94
  • 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化

    大肠杆菌感受态细胞的制备和转化

    概 述在自然条件下,很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内,但在人工构建的质粒载体中,一般缺乏此种转移所必需的mob基因,因此不能自行完成从一个细胞到另一

    2024-09-19 96
  • 基因转染实验(脂质体介导DNA转染法)

    基因转染实验(脂质体介导DNA转染法)

    脂质体(lipofectin regeant,LR)试剂是阳离子脂质体N-[1-2,3-Dioleyoxy, Propyl]-n, n,n-Trimethyla

    2024-09-19 83
  • 计算感受态细胞转化率公式中的稀释倍数

    计算感受态细胞转化率公式中的稀释倍数

    转化后在含抗生素的平板上长出的菌落即为转化子,根据此皿中的菌落数可计算出转化子总数和转化频率,公式如下:转化子总数=菌落数稀释倍数转化反应原液总体积/涂板菌液体

    2024-09-19 105
  • 细胞转染操作方法

    细胞转染操作方法

    转染 ,是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。转染大致可分为物理介导、化学介导和生

    2024-09-19 79
  • 教你如何目测OD600

    教你如何目测OD600

    我曾经认识一个做博士后的家伙,这哥们竟然研究荒谬的怎么用眼睛“猜”菌液的OD值,我当时很是羡慕嫉妒恨,就在yy如果我能够直接用眼睛检测菌液的OD值,那能节省多少

    2024-09-19 72
  • 各种细胞转染方法比较

    各种细胞转染方法比较

    细胞转染方法包括DEAE-葡聚糖法, 磷酸钙法,阳离子脂质体法,阳离子聚合物,病毒介导法,Biolistic 颗粒传递法 (基因枪粒子轰击法), 显微注射法,电

    2024-09-19 91