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小量培养物中分离 BAC DNA
原理小量 BAC DNA 是从 5 ml BAC 转化细胞培养物中制备的。DNA 的制备采用碱裂解法。BAC DNA 的产量可达 0.1~0.4 μg，足够用
2024-06-01 66 -
大量培养物中分离 BAC DNA
原理BAC 重组子的精细分析，包括详细的限制酶切图谱、DNA 测序或亚克隆，所需 DNA 量都超过小量制备所能提供的量。本方案的制备流程适用于重组 BAC 的大
2024-06-01 75 -
酵母人工染色体的应用
原理直到 20 世纪 80 年代中期，尚无技术可用于基因组 DNA 黏性大片段的分离、扩增和分析。在此之前，如果要对某一 DNA 片段进行详细的物理和功能研究，
2024-06-01 68 -
聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化寡核苷酸实验
材料与仪器无菌的过滤水 乙腈 乙酸铵 正丁醇 不含指示染料的甲酰胺凝胶加样缓冲液 甲酰胺指示染料混合液 甲醇：水溶液 寡核苷酸洗脱缓冲液 TE 溶液 合成寡核苷
2024-06-01 73 -
乙醇沉淀法纯化放射性标记的寡核苷酸实验
材料与仪器乙酸铵 乙醇 TE 放射性标记的寡核苷酸 纯化的原料步骤材料溶液和缓冲液稀释贮存液至适当浓度。乙酸铵（1mol/L)乙醇TE(pH7.6)核酸和寡核苷
2024-06-01 181 -
大小排阻层析法纯化放射性标记的寡核苷酸实验
材料与仪器氯仿 EDTA 乙醇 酚：氯仿 乙酸钠 TE Tris-Cl Tris-SDS 层析缓冲液 放射性标记的寡核苷酸 纯化的原料凝胶过滤树脂 破璃棉 巴斯
2024-06-01 79 -
用Sep-Pak C18柱层析法纯化放射性标记的寡核苷酸实验
材料与仪器乙腈 碳酸氢铵 TE 溶液 放射性标记寡核苷酸离心干燥机 微量离心管放于管架或收集器 Sep-Pak 经典层析柱 注射器步骤材料溶液和缓冲液稀释贮存液
2024-06-01 102 -
用大肠杆菌 Klenow 片段标记合成的寡核苷酸实验
材料与仪器甲酰胺加样缓冲液 大肠杆菌 DNA 聚合酶 IKlenow 片段 变性聚丙烯酰胺凝胶 寡核苷酸引物 寡核苷酸模板 [α-32P]dNTP磷荧光粘贴标签
2024-06-01 898 -
寡核苷酸探针在溶液中的杂交实验
材料与仪器寡核苷酸杂交液 寡核苷酸预杂交液 SSC 或 SSPE TEAC1 洗涤液 TMAC1或 TEACl TMAC1 洗涤液 核酸和寡核苷酸 放射性标记的
2024-06-01 77 -
解链温度的实验测定
材料与仪器变性液 中和缓冲液 寡核苷酸预杂交液 酚: 氯仿 乙酸钠 SSC 酶切双链靶 DNA 的适当的限制酶 对照 DNA 靶 DNA 寡核苷酸探针煮沸水浴装
2024-06-01 80 -
真核表达文库的构建与筛选实验
材料与仪器宿主细胞 质粒或λ噬菌体表达载体 包装提取物 电转化感受态大肠杆菌限制性内切核酸酶缓冲液 限制性内切核酸酶 通过 poly(A)+富集的 mRNA c
2024-06-01 67 -
外显子捕获与扩增
材料与仪器大肠杆菌菌株 HB101 质粒 pSPL3 COS-7 细胞 载体 pBluescriptⅡ 大肠杆菌 DH5αpSPL3 多克隆位点图谱 限制性内切
2024-06-01 93 -
用大片段基因组 DNA 克隆直接筛选 cDNA实验
材料与仪器扩增缓冲液 DNA 聚合酶 DNaseI 限制性内切核酸酶 ATP 链霉亲和素-磁珠结合缓冲液 T4DNA 连接酶 热稳定 DNA 聚合酶 琼脂糖凝胶
2024-06-01 74 -
琼脂糖凝胶中DNA的回收（DEAE-纤维素膜电泳）
原理从琼脂糖凝胶回收 DNA 是通过电泳至带正电荷的 DEAE-纤维素膜上完成的。这种方法首先利用适当浓度的琼脂糖凝胶电泳分离 DNA 片段，然后紧靠目的 DN
2024-06-01 86 -
琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中DNA的回收（电洗脱至透析袋）
原理这种技术（McDonell et al. 1977 ) 可以从琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶切片回收分子质量范围较宽的双链 DNA，并且产量较高。这种方法多少有
2024-06-01 88
