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痘苗载体转染细胞实验（DOTAP 法）
原理将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上，外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后，将重组质粒转染病毒感染的细胞，痘苗病毒基因组与质粒上同源的部分
2024-05-30 84 -
痘苗载体转染细胞实验（CaCl2 法）
原理将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上，外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后，将重组质粒转染病毒感染的细胞，痘苗病毒基因组与质粒上同源的部分
2024-05-30 87 -
痘苗病毒纯化实验（大规模纯化）
原理对于很多研究，部分纯化的病毒就足够了（进行到本实验步骤 14）， 如果是纯化 MVA 病毒，则不能用胰酶消化，也不能用 CEF 细胞或 BHK-21 细胞代
2024-05-30 82 -
四环素控制系统诱导基因表达实验（pTet-tTAK 稳定转染（第二轮））
原理tTA 是一种融合蛋白，它是由来自于大肠杆菌的四环素抑制蛋白和疱疹病毒的 VP16 蛋白的转录激活区域组成的。在缺乏四环素时，tTA 就结合到并激活位于基因
2024-05-30 69 -
四环素控制系统诱导基因表达实验（pTet-tTAK 稳定转染（第一轮））
原理tTA 是一种融合蛋白，它是由来自于大肠杆菌的四环素抑制蛋白和疱疹病毒的 VP16 蛋白的转录激活区域组成的。在缺乏四环素时，tTA 就结合到并激活位于基因
2024-05-30 75 -
两种重组痘苗病毒共感染细胞
原理含有 pT7 控制的外源基因（本实验「重组痘苗病毒（VTF7-3）感染后的脂质体转染」）的重组质粒，通过同源重组可整合到痘苗病毒中,并制备重组病毒储液。将此
2024-05-30 82 -
重组痘苗病毒（VTF7-3）感染后的脂质体转染
原理本方案从构建外源基因位于 PT7 和 T7 终止子之间的质粒载体开始，然后用重组质粒通过脂质体介导转染已经被vTF7-3（可以持续表达T7 RNA聚合酶的痘
2024-05-30 104 -
组织切片染色方法大全
1油红O染色（Oil Red O Stain）油红O染色可用于脂肪细胞和中性脂肪的组织学染色。主要试剂丙二醇、油红O溶液、苏木精溶液染色特点脂肪细胞：红色中性脂
2024-05-27 1024 -
PCR 产物电泳银染实验（聚丙烯酰胺凝胶法）
原理聚丙烯酰胺凝胶（PAG）是由丙烯酰胺单体和交联剂亚甲基双丙烯酰胺，在引发剂过硫酸胺（AP）提供自由基和催化剂四甲基乙二胺（TEMED）的作用下聚合而成。丙烯
2024-05-25 71 -
用于 PCR 的模板 DNA 制备实验（胸腹水或尿液）
材料与仪器步骤1. 标本 10 ml 以上，2000 r/min 离心 10 分钟，倒去上清液。用指弹匀沉淀物，加入适量组织裂解液，37℃ 下放置半小时以上。2
2024-05-25 81 -
用于 PCR 的模板 DNA 制备实验（含血标本）
材料与仪器步骤1. 3 ml 外周血或 1 ml 骨髓液放入含 50 μl 0.5mol/L EDTA 的无菌离心管（15 ml 管）中。2. 2000 r/m
2024-05-25 81 -
用于 PCR 的模板 DNA 制备实验（冰冻片）
材料与仪器步骤1. 将 10 μl 冰冻切片直接放入含组织裂解液的离心管中。2. 无菌尖头刀片刮下，放入 300～900 μl 组织裂解液中，并加入 20 mg
2024-05-25 71 -
直接法（DNA 免提法）
材料与仪器步骤1. 标本太少时，可将一张石蜡切片经脱蜡，水化，蒸馏水清洗，无菌蒸馏水浸泡，取出晾至半干。2. 加入 20～80 μl 直接裂解液中，加 20 m
2024-05-25 55 -
改进的石蜡切片 DNA 提取方法
材料与仪器步骤1. 5 μm 厚的石蜡切片 5 至 10 张贴在干净的载玻片上，常规烘片，脱蜡，水化，蒸馏水清洗，无菌蒸馏水浸泡，取出晾至半干。2. 无菌尖头刀
2024-05-25 138 -
酚-氯仿法提取石蜡组织中 DNA
材料与仪器步骤1. 10 mm 厚石蜡切片 10～15 张，置入消毒后的 1.5 ml Eppendorf 管中。2. 脱蜡 二甲苯 1200 μl，9000
2024-05-25 95
