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缺口平移实验基本方案
原理缺口平移是一种将标记核苷酸掺入到DNA中的方法,这些DNA可以是孤立的DNA片段或是一个完整克隆。该方法利用两种酶的联合作用:DNA酶I在DNA链上打开缺口
2024-05-25 111 -
FISH 技术基本实验基本方案
材料与仪器70%乙醇 SSC 磷酸盐缓冲溶液(PBS) Hemo-De清理试剂 蛋白酶溶液水浴锅 增湿器 玻片步骤一、制备培养的中期细胞标本1.在一个独立小室里
2024-05-25 95 -
质粒构建技术(双酶切实验)
简介在探索基因功能的实验中,我们需要过表达目的基因以判断其发挥的功能,因此我们需要将目的基因构建到表达载体上,再将载体通过侵染或瞬时表达的方式转入植物。双酶切实
2024-05-25 110 -
质粒构建技术(同源重组法构建质粒)
简介质粒的构建是分子生物学研究中常用的实验技术,质粒是能够自主复制的环状 DNA 分子,将特定的基因序列插入到工程质粒中,再把质粒转化到细菌、细胞或酵母中,使质
2024-05-25 148 -
质粒构建技术(重组酶构建质粒)
简介基于同源基因重组原理,适用于向几乎任何载体在任何位点进行定向克隆,无需考虑插入片段自身携带的酶切位点可高效克隆 50bp~10kb 片段,同时构建时间也大大
2024-05-25 97 -
质粒构建技术(T4 DNA Ligase)
简介T4 DNA Ligase 即 T4 DNA 连接酶,可以催化粘端或平端双链 DNA 或 RNA 的 5’-P 末端和 3’-OH 末端之间以磷酸二酯键结合
2024-05-25 95 -
碱裂解法(质粒提取)
材料与仪器溶液I 50mmol/L葡萄糖 25mmol/L Tris.Cl(pH8.0) 10mmol/LEDTA(pH8.0)步骤(一)细菌培养物的生长;(二
2024-05-25 81 -
CaCl2 法制备感受态细胞
材料与仪器【 器材 】 1 .培养皿 2 .恒温培养箱 【试剂 】 1 . LB 培养基 2 .选择性 LB 琼脂培养平板(含氨苄青霉素,终浓度为 50μg/m
2024-05-25 68 -
密度梯度离心法(核酸提取)
材料与仪器【试剂】比重1.0770.001的聚蔗糖-泛影葡胺(商品名为淋巴细胞分离液)。 Hank's液(无Ca2+、Mg2+) 10%小牛血清RPMI
2024-05-25 75 -
核酸提取薄层培养
材料与仪器【材料】组织块【试剂】PBS【仪器】培养液,培养箱步骤1. 将组织剪成1mm3左右的组织块;2. 用PBS缓冲液清洗组织块3次;3. 将组织块按照一定
2024-05-25 64 -
核酸提取法
材料与仪器【试剂】1. 蛋白酶 K(10 mg/ml),-20℃ 保存。2. TE(pH 8.0):10mmol/L Tris.Cl(pH 8.0),1 mmo
2024-05-25 78 -
双萤光素酶实验
材料与仪器【材料】目的片段;基因载体pGL3-basic;phRL-TK;LAR II;1X PLB;Stop&Glo;细胞裂解液步骤1、报告基因质粒的构建。将
2024-05-25 84 -
血基因组DNA中量试剂盒提取法
原理本试剂盒采用独特的两相分离技术,结合DNA制备膜选择性地吸附DNA的方法达到纯化基因组DNA的目的。适合从3 ml的抗凝人或哺乳动物全血获得100 ug的基
2024-05-25 66 -
血基因组DNA大量试剂盒提取法
原理本试剂盒采用独特的两相分离技术,结合DNA 制备膜选择性地吸附DNA 的方法达到纯化基因组DN的目的。适合从5 ml 的抗凝人或哺乳动物全血,或500 ul
2024-05-25 71 -
血基因组DNA 试剂盒提取法
原理采用特殊的细胞裂解和蛋白去除液(包括蛋白酶K 裂解)从抗凝全血中得到基因组DNA。材料与仪器抗凝全血血基因组DNA 试剂盒96孔深孔板 96圆孔板 96孔D
2024-05-25 65