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DNA 纯化实验(DNA凝胶回收试剂盒纯化法)
原理本试剂盒适合从各种琼脂糖凝胶中提取多至 8 μg DNA(70 bp-10 Kb),回收率为 60-85%。琼脂糖凝胶在温和的缓冲液(DE-A 溶液)中溶解
2024-05-25 85 -
DNA 纯化实验(PCR清洁试剂盒纯化法)
原理硅胶膜可在高盐条件下结合DNA,又可在低盐条件下与DNA分离。用于清洁目的的含DNA溶液中的引物、单核苷酸、酶、矿物油、盐离子等杂质因为没有与DNA相似的特
2024-05-25 89 -
DNA 探针的标记实验(探针标记法)
原理分子杂交是核酸链以碱基配对规则的一种结合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一条用某种可以检测的进行标
2024-05-25 94 -
油红染色法
油红作为脂肪染色剂,其染色步骤简便,染色结果肯定,并且优于苏丹Ⅳ。 试剂配制:油红O 0.5g异丙醇(含量98%) 10
2024-05-25 1221 -
Southern印迹技术
简介Southern印迹技术(Southern blot)是将DNA转移到固相支持物上,然后与存在于液相中的标记探针进行杂交的过程。Southern印迹技术可检
2024-05-25 91 -
Southern blot技术
原理具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下,可按碱基互补的原则特异性地杂交形成双链。利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性
2024-05-25 93 -
cDNA文库构建
原理cDNA 文库是指某生物某发育时期所转录的全部 mRNA 经反转录形成的 cDNA 片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。经典 cDNA 文库构建的基本原理
2024-05-25 108 -
DNA文库的构建及其筛选
原理高等植物基因组的一个显著特征是其内含有大量的 DNA 重复序列, 重复序列常位于异染色质区, 因此可能与染色体的结构有关 . 季静等根据国际上 对基因组、染
2024-05-25 79 -
质粒 DNA 大量制备实验(平衡离心法)
原理这种方法可以得到除去了大多数杂质的高纯度质粒DNA。但它需要使用溴化乙锭,并且需要长时间的超速离心来形成密度梯度。 材料与仪器DNATE 氯化铯 溴化乙锭
2024-05-25 74 -
质粒 DNA 大量制备实验(碱裂解法)
原理这一方案科能是最常用的质粒制备方法,该法不仅相当决捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。材料与仪器大肠杆菌葡萄糖 Tris EDTA TE NaOH SD
2024-05-25 79 -
M13 噬菌体衍生载体的制备实验(载体衍生法)
材料与仪器质粒YT培养基离心机 分光光度计 摇床步骤1. 将来自一个单菌落的过夜培荞新鲜菌液按1 :50稀释,在含有适当抗生素的2xYT培养液(1~5 ml)
2024-05-25 63 -
CTAB法(植物组织制备基因组 DNA 实验)
原理加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出,而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部, 从而达到提
2024-05-25 82 -
氯化铯法(植物组织制备基因组 DNA 实验)
原理加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出,而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部, 从而达到提
2024-05-25 69 -
制备DNA(哺乳动物中制备基因组 DNA 实验)
材料与仪器动物组织PBS 乙酸铵 乙醇 酚 氯仿 异戊醇 TE离心机 摇床 研钵步骤1. 切下组织并立即剪成小块,置于液氮中冻结。 2. 将200 mg~1
2024-05-25 68 -
DNA定点突变实验
原理定点突变是指通过聚合酶链式反应(PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因组,也可以是质粒)中引入所需变化(通常是表征有利方向的变化),包括碱基的添加、删除
2024-05-22 141