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总 DNA 质量检测及酶切实验
原理在pH值为8.0~8.3时,核酸分子碱基几乎不解离,磷酸全部解离,核酸分子带负电,在电泳时向正极移动。采用适当浓度的凝胶介质作为电泳支持物,在分子筛的作用下
2024-05-22 68 -
DNA 的琼脂糖凝胶电泳实验
原理DNA琼脂糖凝胶电泳的基本原理是利用DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时具有的电荷效应和分子筛效应。电荷效应是指DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电,在电场中
2024-05-22 541 -
常规方法(DNA片段的回收实验)
材料与仪器NA片段纯化试剂盒 异丙醇离心机 电泳仪 电泳槽 取液器 微量真空装置 抽滤装置步骤1. PAGE电泳,如EB染色的则在紫外灯下切下目的片断,如龈染
2024-05-22 57 -
液氮冻融法(DNA片段的回收实验)
材料与仪器DNA片段纯化试剂盒 异丙醇离心机 电泳仪 电泳槽 取液器 微量真空装置 抽滤装置步骤1. 紫外灯下从胶上切下目的片段,放入一Epphendof管中
2024-05-22 58 -
微量柱法(DNA 片段的回收实验)
材料与仪器DNA片段纯化试剂盒 异丙醇离心机 电泳仪 电泳槽 取液器 微量真空装置 抽滤装置步骤1. 紫外灯下从胶上切下目的片段,放入一Epphendof管中
2024-05-21 68 -
树脂回收法(DNA 片段的回收实验)
原理本方法特别适合于PCR片段的回收,具有纯度高、操作简洁等特点,经此方法回收的片段可有效的用于重组载体构建。通过15分钟的纯化过程,PCR产物即能被有效地从含
2024-05-21 80 -
DNA片断的酶切实验
原理酶切指采用粘末端连接必须对目的DNA分子和载体分子进行酶切以获得相应的粘末端进行连接。材料与仪器DNA片段TE缓冲液离心机 恒温水浴 取液器 电泳仪 电泳槽
2024-05-21 84 -
DNA结合蛋白测定实验
原理本分析方法是一种简单、快速和极为灵敏的用于检测粗制提取物中序列特异性的DNA结合蛋白的方法。在电泳时,与末端标记的DNA片段特异结合的蛋白质阻滞了片段的迁移
2024-05-21 80 -
鲑精担体 DNA 制备实验基本方案
材料与仪器鲑精DNATE 酚 氯仿 乙酸钠离心机 摇床 超声仪步骤1. 将TE缓冲液加入装有干燥鲑精DNA的烧杯中,至鲑精DNA浓度为5~10 mg/ml。用
2024-05-21 72 -
细胞质 S-100 组分的制备实验基本方案
材料与仪器细胞质KCl 高盐缓冲液透析膜 离心机步骤1. 测量细胞质提取物的体积,加入0.11倍体积的10细胞质提取缓冲液,充分混合。 100 000 g 离
2024-05-21 80 -
用X-gal和IPTG筛选细菌菌落(α互补)
原理显色底物 X-gal 可与细菌培养物混合,与溶化的顶层琼脂混合后铺于选择性培养板。材料与仪器重组质粒转化的 E.coliIPTG 溶液 X-gal 溶液LB
2024-05-21 77 -
筛选构建于λ噬菌体载体的表达文库实验
材料与仪器封闭缓冲液 氯仿 IPTG 抗原-抗体复合物检测试剂 SM TNT 缓冲液 洗涤缓冲液 放射性碘标记第二抗体 第一抗体 LB 琼脂板 LB 顶层琼脂板
2024-05-21 76 -
λ噬菌体的铺平板培养实验
原理噬菌斑起源于单个噬菌体颗粒对单个细菌的感染。第一次感染后合成的子代病毒颗粒吸附和感染邻近细菌,后者依次释放另一代子代病毒颗粒。如果细菌生长在半固体培养基(如
2024-05-21 81 -
λ噬菌体噬菌斑的挑取实验
原理遗传上同源的 λ 噬菌体原种是通过 "挑取” 一个完全独立的噬菌斑并将含有裂解物的琼脂/琼脂糖保存于贮存液中而获得的。获得的原种可用于制备噬菌体的
2024-05-21 103 -
在滤膜上进行细菌DNA的杂交实验
原理本方案介绍如何用放射性标记探针与固定在滤膜上的转化菌 DNA 进行杂交,以及从琼脂板中将与探针特异性杂交的克隆回收培养的方法,这些方法适用于平均长度大于 1
2024-05-21 84