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重组M13噬菌体克隆分析
原理在本方案中，当外源 DNA 大于 200~300 个核苷酸时，用重组 M13 噬菌体克隆感染细菌后释放至周围培养基中的单链 DNA 进行凝胶电泳分析即可鉴定
2024-05-21 69 -
M13噬菌体载体的克隆
原理虽然理论上 M13 重组噬菌体所能携带的外源 DNA 片段没有限制，但实际上是有限的：长片段的外源 DNA 比短片段的更易发生缺失和重排。因此如果可能，最好
2024-05-21 108 -
细胞提取物中β-半乳糖苷酶的测定实验
材料与仪器转染了感兴趣 DNA 的哺乳动物培养细胞大肠杆菌β-半乳糖苷酶 Tris-Cl 磷酸钠 ONPG Na2CO3 β-巯基乙醇 MgCl2步骤材料缓冲液
2024-05-21 82 -
单链和双链M13噬菌体DNA的大规模制备
原理这个方案主要用于制备大量 M13 噬菌体的双链 DNA，因在实验室中 M13 噬菌体经常被用作克隆载体，以及在某些特殊用途时需要制备大量的单链噬菌体 DNA
2024-05-21 69 -
M13噬菌体单链DNA的制备
原理M13 噬菌体单链 DNA 是从感染细胞分泌至周围培养液中的病毒颗粒中制备的，首先在高盐存在下，丝状病毒被聚乙二醇（PEG) 沉淀浓缩，然后用酚抽提释放单链
2024-05-21 64 -
M13噬菌体双链（复制型）DNA的制备
原理感染 M13 噬菌体的细菌含病毒双链 RF DNA，培养基中粗提病毒颗粒中含单链子代 DNA，双链 RF DNA 可以采用类似于质粒纯化的方法从感染细胞的小
2024-05-21 88 -
M13噬菌体液体培养
原理M13 噬菌体原种通常采用液体培养，感染细胞并不裂解而是缓慢生长形成稀悬液。接种几乎总是用一个新挑取的噬菌斑或单个噬菌斑获得的噬菌体颗粒悬液。感染细胞含 2
2024-05-21 73 -
P1噬菌体及其克隆系统的应用
原理P1 噬菌体与 λ 噬菌体同年被发现（Bertani 1951)。两种噬菌体在天然宿主中都是温和噬菌体，它们在实验室的研究历程也几乎相同。λ 噬菌体一经被发
2024-05-21 84 -
M13 噬菌体铺平板
原理M13 噬菌斑是由单个病毒感染单个细菌后形成的。子代病毒颗粒感染邻近细菌, 然后又产生下一代病毒颗粒，细菌在半固体培养基（如含琼脂或琼脂糖）上生长时，子代病
2024-05-21 91 -
λ噬菌体分离物的快速分析(从液体培养物中纯化λDNA)实验
原理如本方案所述，λ 噬菌体 DNA 可很容易地从液体培养物中纯化出来。而前一个方案则阐述了从平板裂解物中纯化 λ 噬菌体 DNA 的方法。一般来说，λ 噬菌体
2024-05-21 76 -
噬菌体DNA在滤膜上的杂交实验
原理通过用 32P 标记探针的原位杂交，可筛选携带有固定化 DNA 的滤膜，这些 DNA 来源于噬菌斑。该技术是强有力的、高度特异的和很灵敏的，能从数千个噬菌斑
2024-05-21 76 -
噬菌体DNA从噬菌斑到滤膜的转移实验
原理一个从 λ 噬菌体文库中鉴别和分离特异重组子的方法，在分子克隆历史的早期由 Bemon 和 Davis (1977) 建立起来。这个目前仍经常使用的方法，包
2024-05-21 92 -
λ噬菌体臂与外源基因组DNA片段的连接实验
原理当 λ 噬菌体臂与外源基因组 DNA 片段相连时，必须考虑到两个参数：噬菌体臂与潜在插入片段的摩尔比，以及在反应混合物中各类 DNA 的浓度。材料与仪器噬菌
2024-05-21 71 -
CPB沉淀法纯化放射性标记的寡核苷酸实验
材料与仪器十六烷基溴化吡啶 EDTA-Tris EDTA-Tris-DNA 溶液 乙醇-乙酸钠溶液 乙醇 乙酸钠 TE(pH7.6) 或适当的预杂交液 核酸和寡
2024-05-21 75 -
寡核苷酸5'末端磷酸化实验
材料与仪器T4噬菌体多核苷酸激酶缓冲液 Tris-Cl T4噬菌体多核苷酸激酶 寡核苷酸 [γ-32P]ATP微量离心管 水浴箱步骤材料缓冲液与溶液稀释贮存液至
2024-05-21 69
