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交叉电泳技术
(一)原理 交叉免疫电泳是把琼脂平板电泳和火箭电泳结合起来的一种方法。先将抗原样品在琼脂凝胶中进行电泳分离,然后使已分开的各抗原成分与原泳动方向呈90度角的方向
2025-05-28 49 -
标记抗原的放射免疫技术(RIA)
(一)原理 当抗原遇到相应的抗体便形成抗原抗体复合物(Ag+Ab ↔Ag -Ab),当用放射性同位素标记抗原再与相应的抗体结合便形成标记抗原和抗体复合物。即:
2025-05-28 63 -
荧光素标记抗体
( 一 ) 原理 目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素 (Fluorescein isothiocynate,FITC) 或罗达明 (Lissam
2025-05-28 55 -
细胞爬片、甩片的制备
(一)细胞爬片的制备 (1)如果使用载玻片或盖玻片,必须在使用之前灭菌。可以一次灭菌并贮存在无菌状态下。如果使用少量的盖玻片,用金属镊子夹住盖玻片,在70%乙醇
2025-05-28 61 -
免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation):蛋白质的浓缩技术
(一)透析袋浓缩法利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无透析袋可用玻璃纸代替),结扎,把高分子( 6 000 - 12 00
2025-05-28 61 -
免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation):蛋白定量技术
(一)双缩脲测定法1 .原理 蛋白质中的肽键有双缩脲反应,在碱性溶液中与二价铜离子形成蓝紫色的络合物,在一定的范围内,颜色的深浅与蛋白质的含量成正比。此法特异性
2025-05-28 42 -
免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation):连续提取免疫球蛋白法
(一)试剂及配制1 .饱和硫酸铵液2 .各种磷酸盐缓冲液⑴ 0.2mol/L 原液A 液: 0.20Mol/L NaH2 PO4 液NaH2 PO4 · H2
2025-05-28 38 -
Western-Blot试剂配制
(一)母液1. 1.0mol/L Tris·HCl Tris (MW121.14) 30.29g 蒸馏水 200ml 溶解后,用浓盐酸调pH至所需点(见下所示)
2025-05-28 66 -
常见的免疫检测六大技术
(一)免疫酶染色试验 (immunoenzyme staining test,IEST) 免疫酶染色试验以含寄生虫病原的组织切片、印片或培养物涂片为固相抗原,当
2025-05-28 43 -
抗体检测以及杂交瘤细胞的选择
(一)抗体检测 用检测抗体的方法从杂交细胞中筛选出生产指定抗体的杂交株是很重要的。检测抗体的方法很多,从沉淀反应到放射免疫测定。由于细胞培养液中的抗体浓度通常是
2025-05-28 58 -
免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation):禽IgA提取与纯化
(一)材料与试剂配制1 .禽胆汁2 .饱和硫酸铵溶液3 . 0.01Mol/L pH7.4PBS 液4 . 0.10Mol/L pH6.4PBS 液( 0.30
2025-05-28 59 -
IgG的分离与提纯
(一)材料与试剂配制 1.动物血清 2.硫酸铵饱和溶液 硫酸铵 800g~850g H2O 1 000ml 加热至绝大部分溶质溶解为止,趁热过滤,置室温过夜,然
2025-05-28 62 -
IgA的分离与提纯
(一)材料与试剂配制 1.DEAE52纤维素 2.0.10Mol/L ZnSO4 液 ZnSO4 ·7H2 O 2.88g 加水至1 000.00ml 3.饱和
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免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation):IgA的分离与提纯
(一)材料与试剂配制1 . DEAE52 纤维素2 . 0.10Mol/L ZnSO4 液ZnSO4 · 7H2 O 2.88g加水至 1 000.00ml3
2025-05-28 48 -
免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation):IgG的分离与提纯
(一)材料与试剂配制 1 .动物血清2 .硫酸铵饱和溶液硫酸铵 800g~850gH 2 O 1 000ml加热至绝大部分溶质溶解为止,趁热过滤,置室温过夜,然
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