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单克隆抗体制备常见问题分析
1. 免疫失败的可能原因及应采取的措施答：有时不能获得满意的抗血清，可从下列几方面找原因，并改进之。（1）免疫动物的种属及品系是否合适，可考虑改变动物的种属或品
2025-05-28 62 -
多克隆抗体制备
1. 免疫动物：两只新西兰兔2. 佐剂：首先用完全弗氏佐剂（CFA），后用不完全弗氏佐剂（IFA）。3. 免疫原：蛋白或KLH偶联的多肽。每次免疫100-200
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酶免疫电镜操作步骤
1．酶标抗体的制备 2．取材 将培养细胞或悬浮细胞用0.1Mol/L PBS液冲洗，离心沉淀后，立即转入固定液(2%甲醛液或2%戊二醛液均可)pH 7.2，4℃
2025-05-28 78 -
记忆性B细胞介导的抗体应答
1．留存抗体和桨细胞 抗原清除后，体内留存的抗体可特异性地直接结合再次出现的病毒颗粒、细菌和寄生虫，对后者实施中和作用和调理功能，构成记忆性抗感染的第一道防线，
2025-05-28 69 -
小鼠腹水抗体的制备
1．抗原的处理与小鼠腹水粗抗体的收集现在以B亚基的抗体制备为例说明：取2mg的蛋白，溶于100µl的10％SDS中，加入等体积的上样缓冲液，沸水浴3min，进行
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影响制备高效价专一性抗血清的主要因素
1. 抗原本身的有关性质：抗原刺激免疫动物产生抗体的能力，是否使用佐剂，注射途径及注射间隔时间等。2. 抗原必须纯化：对于免疫用的抗原，成分必须均一，除了作为免
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非标记抗体免疫电镜操作步骤
1．经典法 （1）将被检病毒材料0.9ml，加1︰5～1︰10稀释的特异性免疫血清0.1ml充分混合。 （2）置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃过夜。 （3
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E.coli/ phage 裂解液预吸附血清
1. 将 E.coli /phagelysate 以 1:10-20 稀释在 TBST溶液中。2. 将 4 张 82mm 的 nitrocellulosemem
2025-05-28 78 -
从免疫血清纯化抗体
从免疫血清纯化抗体 1． 剪取一小条0.45 μm 的硝酸纤维膜，置于1.5ml eppendorf 管中，浸没于1 ml 1 mg/ml 的抗原溶液中，5 m
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感知机制和反馈调控途径
1．激活性受体和抑制性受体 几乎所有的免疫细胞都表达抑制性受体。抑制性受体与激活性受体并存，是抑制性受体能够显示反馈活性的前提。因为，没有激活和增殖，也就无所
2025-05-28 54 -
PCR产物的检测点杂交
1．寡核苷酸探针杂交 [试剂与配置] 预杂交液：5SSC，5Denhadrt, 0.5%Triton X-100 2
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免疫组化的经验总结－操作要点和技巧
1． 固定：最好用 4% 的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片，甲醛固定有时比冰冻丙酮好；但对于不同的组织和抗原，可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合
2025-05-28 58 -
杂交瘤细胞的制备
1. 骨髓瘤细胞的准备选择生长状态良好的细胞，浑圆透亮，大小均一，边缘清晰，排列整齐，呈半致密分布。弃上清，以不完全培养基洗涤一次后，用10mL不完全培养基将骨
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白细胞的纯化
1．低渗处理法 [试剂及配制] （1）蒸馏水 （2）1.8%氯化钠溶液 [操作方法] （1）向
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单克隆抗体技术-脾细胞
1．材料 (1) 免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。 (2) 1640培养液 (3) 2.5％FCS－1640营养液 2．操作方法 (1) 拉颈或用CO2
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