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请教 luciferase 的 具体操作PROTOCOL
问:我要做LUCIFERASE 了,可是我一点概念都没有。有哪位有具体的操作PROTOCOL?还有一些白痴问题luciferase 要检测什么呢?是把我的带有L
2025-03-20 35 -
GFP转染后克隆筛选
问:我最近对肿瘤细胞转染GFP,其中不含有其他外源性基因。转染后短期内发现阳性细胞非常多,可是随着时间及细胞的增殖,培养孔内的细胞总数在不断的增加,但是发绿色荧
2025-03-20 36 -
免疫磁珠分选的问题
问:现用免疫磁珠(美天妮)分选cd4+和cd8+T淋巴细胞,效果不是太理想。单个核细胞2106,分离出cd4+只有1105个,buffer等试剂都没有问题。不知
2025-03-20 30 -
细胞稳定转染建系后再转染的问题
问: 细胞稳定转染建系后,转染的质粒细胞内本身有较高表达,我的质粒是点突变的质粒,我做的是稳定转染,按理论稳定建系后不应该对细胞增值有影响的。根据实验设计,我往
2025-03-20 31 -
如何提高U251的转染效率
问:手上有U251细胞,pEGFP载体,现在将不带外源基因的载体转u251的效率都很低,10%都没有。所用转染试剂:invitrogen的Lipofectami
2025-03-20 41 -
免疫荧光双标
问:神经干细胞nestin和EphrinA4的免疫荧光双标怎么做?答:过程和一般的免疫染色一样就是封闭的时候用两种血清混合封闭1:1加入一抗和二抗的时候也是混合
2025-03-20 28 -
Immunohistochemical Analysis of 8-Nitroguanine, A Nitrative DNA Lesion, in Relation to Inflammation-
Chronic inflammation is induced by various infectious/infected agents and by man
2025-03-20 40 -
转染过程
问:哪位高手给分别指点一下脂质体和质粒转染的具体过程!答:具体过程都大至差不多,一管混匀质粒,另一管混匀脂质体,脂质体混匀后过几分钟,逐滴加入混匀的脂质体,温柔
2025-03-20 41 -
稳定转染细胞株的鉴定
问:目的蛋白7kd,筛了稳定株,可western检测不到,因为电泳时marker也跑得不好,因此不能确定是假阳性。载体上带了myc tag,不知做免疫荧光来检测
2025-03-20 46 -
同一种细胞,不同质粒转染,那G418筛选浓度都一样吗
问:跟文献上的细胞一样,但跟他的质粒不一样,文献上说G418筛选浓度为500mg/ml,那我可以直接用这个浓度筛选我转染以后的浓度吗?质粒的不同对同一细胞的G4
2025-03-20 38 -
关于CHO-K1细胞稳定转染和瞬转COS的问题
问:各位大虾小弟我最近一直在瞬转COS细胞分泌表达上清一直没有表达也浓缩过再做ELISA WB 都没有啊时间挺长了实在等不及了就想稳定转染cho-k1细胞系通过
2025-03-20 30 -
悬浮细胞转染后筛选问题求助
问:大家好,我第一次作转染,是悬浮细胞,已经在园子里看了好多这方面的资料,收获很大,可还是几个问题要问大家:1)我打算用24孔板作转染,之后的筛选过程中肯定会有
2025-03-20 55 -
逆转录病毒包装
问:大家好,请问有人做过逆转录病毒包装吗,我最近在用PT67包装病毒,按照说明书上的要求,在细胞长到70%左右汇合时加入质粒和脂质体和无血清培养液培养4小时后更
2025-03-20 37 -
G418筛选实验相关问题
问:G418筛选预实验用未转染的细胞做,选10-14天内细胞死亡的最小浓度,然后将更高一级别的浓度应用于转染的细胞,是这样吗?答:G418是一种细胞毒性药物(氨
2025-03-20 39 -
cos-7的转染
问:cos-7的转染1、细胞的培养:我们在培养细胞时发现该细胞长的很快,不到2天的时间就长满了;消化的时候老是成块的掉,如果消化时间加长,细胞也能成单个的,但是
2025-03-20 39