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基因枪法转化小麦实验-轰击后未成熟盾片培养
材料与仪器幼胚盾片新霉素磷酸转移酶 草胺膦乙酰转移酶基因基因枪 诱导培养基 分化培养基步骤1. 诱导愈伤( 1 ) 基因枪轰击后,将盾片分散转移,每个重复分到
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基因枪法转化小麦实验-使用 PDS-1000/He 基因枪轰击
材料与仪器金粉乙醇 消毒液步骤注意:由于基因枪通过高压使粒子加速到极高的速度,故操作基因枪时应采取适当的安全措施并且佩戴安全眼镜。在任何使用基因枪转化的实验中,
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基因枪法转化小麦实验-DNA包裹金粉颗粒
材料与仪器BIO-RAD 亚微米金粉无水乙醇 TE 缓冲液 亚精胺离心管步骤1. 准备金粉颗粒( 1 ) 称取 20 m BIO-RAD 亚微米金粉(0.6 μ
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基因枪法转化小麦实验-准备供体材料
材料与仪器幼胚盾片乙醇 漂白消毒剂诱导培养基步骤下面介绍的是经过优化的针对幼胚盾片转化的方法,幼穗可以代替幼胚盾片使用。对某些特定的品种,幼穗转化比幼胚盾片转化
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农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验-转化效率的计算
材料与仪器Southern 杂交分析步骤1. 转化效率通常用百分比表示。计算方法为:确定的独立转基因单株总数 x100 /侵染的总幼胚数。2. 如果一个胚得到一
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农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验-转基因植株的鉴定及种子的收获
材料与仪器再生苗Magenta 盒步骤1. 经第二轮选择后,挑出根茎生长良好的再生苗(见注 16 ) 移栽于土壤中。首先,将各株再生苗移入 8 cm2 的盆钵里
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农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验-选择
材料与仪器愈伤组织选择培养基 Magenta 培养盒步骤1. 将培养物转移至第一轮选择培养基中(表 5.1,选择培养基 1 ) ( 见注 15)。一些愈伤组织在
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农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验-胚性愈伤的诱导和再生
材料与仪器胚诱导培养基 再生培养基步骤1. 共培养 2~3 天后,将胚转移至诱导培养基以诱导胚性愈伤(表 5.1,诱导培养基 a 适用于面包小麦,诱导培养基 b
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农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验-幼胚的接种
材料与仪器幼胚盾片Silwet 农杆菌菌液培养皿步骤1. 幼胚盾片接种于侵染培养基后,从摇床上取出一管菌液(见注 9),向管中加入 60 μl 1%(V/V)
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农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验-根癌农杆菌接种外植体的准备(见注 6)
材料与仪器面包小麦 硬粒小麦乙醇层流罩超净台步骤1. 面包小麦和硬粒小麦开花后 12~16 天剪下幼穗,将种子幼体用 70% ( V/V)的乙醇浸泡 1 min
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农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验-根癌农杆菌菌液的准备
材料与仪器农杆菌细胞根癌农杆菌甘油原液 抗生素MG L 液体培养基步骤1. 从根癌农杆菌甘油原液中吸取 400 μl 加入含 10 ml MG/L 液体培养基并
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小麦花器官转化实验
材料与仪器小麦种子壮观霉素 利福平温室或走入式生长箱 奥绿肥 塑料盆 LB 培养基 MS 培养基 解剖镜 巴龙霉素步骤一、材料1. 植物材料Crocus 或 C
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植物原位接种介导的小麦高效农杆菌转化方法实验
材料与仪器缓释肥 乙酰丁香酮盆钵 植物支撑器 LB 培养基 通用型试管 YEP 固体培养基 TSIM 培养基步骤一、材料1. 母体植株的生长( 1 ) 将母体植
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基因枪法转化大麦实验
材料与仪器麦穗植物凝胶 乙醇 次氯酸钠 蒸馏水 亚精胺EP 管 移液枪步骤1. 组织培养基的准备( 1 ) 首先准备所需浓度 2 倍的植物凝胶,高压灭菌(见注
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农杆菌介导的大麦转化方法实验
材料与仪器植物凝胶 pBract 质粒 pSoup 质粒利福平 卡那霉素MG L 培养基步骤1. 组织培养基的准备提前准备好所需浓度 2 倍的植物凝胶,高压灭菌