农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验-幼胚的接种

幼胚盾片
Silwet 农杆菌菌液
培养皿

步骤

1. 幼胚盾片接种于侵染培养基后，从摇床上取出一管菌液（见注 9），向管中加入  60 μl 1%（V/V）的 Silwet，至终浓度为 0.015%。
2. 完成 3.2 节的步骤 3 后，立即将离心管中所有的农杆菌菌液（4  ml) 倒入已接种幼胚盾片的培养皿中 [见注 10，图 5.1  (a )]。

3. 将培养皿转移至黑暗条件下放置 15 min 至 3 h  ( 见注 11)。在此期间可以进行其他培养皿的农杆菌菌液侵染操作。
4. 吸去多余的农杆菌悬液 [ 图 5.1 (b) ] ，应注意不要吸到胚（见注 12)。将胚转移至含固体接种培养基的新培养皿中，接种时盾片向上，胚轴面需接触到培养基。
5. 将共培养培养板置于 22~23℃ 暗培养 2~3 天。