农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验-根癌农杆菌接种外植体的准备（见注 6)

面包小麦 硬粒小麦
乙醇
层流罩超净台

步骤

1. 面包小麦和硬粒小麦开花后 12~16 天剪下幼穗，将种子幼体用 70% ( V/V）的乙醇浸泡 1 min，再换用 10% 乙醇（V/V）轻轻晃动 10 min 进行表面消毒，最后用足量的灭菌蒸馏水冲洗三次以上（见注 7) 。

2. 在层流罩超净台上，借助体视显微镜从种子幼体中分离出幼胚（见注 8) 。用锋利的手术刀除去胚轴。

3. 将幼胚盾片朝上接入直径 55 mm 或 60 mm、盛有侵染培养基的培养皿，以确保盾片与农杆菌细胞充分接触，与 3.3 节的步骤 2 衔接。为防止添加农杆菌菌液时幼胚漂浮，要确保幼胚同培养基接触良好，每皿最佳约接 50 个幼胚。