ELISA检测实验报告（二）

一、 实验目的

通过Elisa实验技术检测各样本中目的蛋白的表达。

二、 实验样本

三、 实验结果

1.标准品检测值

2.标准品标准曲线

   标准曲线结果显示，本次 cTn-1 检测结果可信。

3. 样品检测结果

四、 结果说明

    如图所示，与Sham组相比，3个CVB3病毒处理组无显著性差异。

五、 ELISA实验原理

往预先包被的微孔中依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的cTn-1呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度 (OD 值)，计算样品浓度。

六、 实验通用仪器及试剂

1. 主要仪器

2.主要试剂

六、重温一下ELISA实验步骤

1.样品处理

血清：3000xg离心10分钟，取上清即可检测。

2.ELISA检测步骤（以试剂盒操作说明书为准）

(1)制备好所有试剂、工作标准品和样品。

(2)从板架上移除多余的微孔板条，将它们放入装有干燥剂包的铝箔袋中，重新密封并4ºC存储。

(3)向适当的孔中加入50µL样品和标准品。

(4)每孔加入50µL抗体混合物。

(4)盖好孔，在室温下温育1小时，400rpm摇动。

(5)弃去溶液并用洗涤缓冲液洗涤3次。

(6)向每个孔中加入100μlTMB,400rpm避光室温孵育100min。

(7)每孔中添加100µL终止液，混匀1min,在450 nm处读取吸光值。