小鼠单个核细胞分离去除脾脏细胞悬液中的红细胞

小鼠单个核细胞分离去除脾脏细胞悬液中的红细胞 脾脏细胞悬液在进行淋巴细胞计数之前最好先去除红细胞（RBC）。胸腺和淋巴结细胞悬液则不必去除红细胞。脾脏细胞的亚群分离也需先去除红细胞。

附加材料：

ACK裂解缓冲液

实验方案：

1. 每个脾脏用约5ml裂解缓冲液悬浮脾脏细胞；一个12ml试管可用于裂解一个或两个脾脏，也可以用50ml离心管裂解更多的脾脏。 2. 室温孵育5min，间以摇动。 3. 加入洗液直至装满容器，以低速离心机上以200g离心10min后弃上清。再洗沉淀一次并以适量培养基重悬以便下一步操作（如去除死细胞、细胞计数或者细胞分离）。

附录：

ACK裂解缓冲液 8.29g NH4 Cl（0.15mol/L） 1g KH2 CO3 （10.0mmol/L） 37.2mg Na2 EDTA（0.1mmol/L） 加800ml水，用1mol/L盐酸调PH至7.2～7.4 补加水至1L 0.2μm滤膜过滤除菌 室温保存