植物组织番红固绿染色步骤

一、番红固绿染色原理与实验准备

植物组织番红固绿染色实验原理：番红是碱性染料能显示维管束植物木质化、木栓化和角质化的组织。固绿是酸性染料，是一种含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂。导管可以被番红染色，筛管可以被固绿染色。木质化的细胞壁及核呈红色，薄壁细胞及细胞质呈绿色。

1、实验仪器准备：生物组织摊烤片机、盖玻片、石蜡包埋机、自动组织脱水机、轮转式切片机、盖玻片、载玻片

2、实验试剂准备：植物番红固绿染色液、中性树胶、无水乙醇、二甲苯

二、番红固绿染色详细操作步骤（以植物组织为例）

1、植物组织切片脱蜡

（1）70℃烤片30 min；

（2）二甲苯（I）中脱蜡10 min；

（3）二甲苯（II）中脱蜡10 min；

（4）100%乙醇（I）中5 min洗去二甲苯；

（5）100%乙醇（II）中5 min洗去二甲苯；

2、切片水化

（1）95%乙醇中水化5 min；

（2）85%乙醇中水化5 min；

（3）75%乙醇中水化5 min；

（4）蒸馏水中水化待用；

3、切片染色

（1）番红染色1-2 h；

（2）流水稍洗；

（3）固绿染色30-60 s；

4、切片脱水

（1）无水乙醇脱水5 min；

（2）无水乙醇脱水5 min；

5、透明

（1）二甲苯（I）透明5 min；

（2）二甲苯（II）再次透明5 min；

6、封片镜检

在石蜡切片的中央滴加一滴中性树胶，盖上盖玻片封固后显微镜下观察拍照。